Sut i Selio Plât PCR

Rhagymadrodd

platiau PCR, sy'n rhan annatod o'r labordy ers blynyddoedd lawer, yn dod hyd yn oed yn fwy cyffredin yn y sefyllfa fodern wrth i labordai gynyddu eu trwygyrch a defnyddio awtomeiddio fwyfwy o fewn eu llifoedd gwaith. Gall fod yn anodd cyflawni'r amcanion hyn tra'n cadw cywirdeb a chywirdeb arbrofion. Un o'r meysydd cyffredin lle gall gwallau ymledu yw trwy selioplatiau PCR, gyda thechneg wael yn caniatáu anweddu samplau, gan newid y pH ac felly amharu ar swyddogaethau ensymatig, a gwahodd halogiad. Dysgu sut i selio aPlât PCRyn dileu'r risgiau hyn yn gywir ac yn sicrhau canlyniadau atgynhyrchadwy.

Dewch o hyd i'r Sêl Cywir ar gyfer eich Plât PCR

Capiau Plât yn erbyn Morloi Ffilm yn erbyn Caeadau
Capiauyn ffordd dda o selio'ch plât gyda sêl dynn, tra'n dal i roi'r hyblygrwydd i chi ddadselio ac ail-selio'r plât yn hawdd iawn heb unrhyw wastraff. Fodd bynnag, mae gan gapiau ychydig o anfanteision allweddol.

Yn gyntaf, bydd yn rhaid i chi brynu'r cap penodol sy'n gydnaws, sy'n golygu nad ydynt yn amlbwrpas. Bydd yn rhaid i chi wneud yn siŵr bod y cap a ddewiswch yn cyd-fynd â'r plât, sy'n dibynnu ar ei wneuthurwr, a dewis naill ai cromennog neu fflat yn seiliedig ar y thermocycler rydych chi'n ei ddefnyddio.

Yn ail, gall cymhwyso'r capiau i'r plât fod yn ailadroddus iawn ac yn ddiflas, gyda'r risg o groeshalogi os rhowch y cap anghywir ar y ffynnon anghywir.

Er bod morloi ffilm yn llai hyblyg o ran tynnu ac ailosod, maent yn amlbwrpas iawn gan y byddant yn ffitio unrhyw fath o blât PCR, heb unrhyw sylw i bwy yw'r gwneuthurwr. Yn syml, gellir eu torri i faint, gan eu gwneud yn effeithiol iawn.

Opsiwn arall yw caead plât. Mae'r rhain yn cynnig llai o amddiffyniad na chapiau a morloi, ac fe'u defnyddir yn bennaf ar gyfer gorchudd tymor byr yn unig i atal halogiad.

Seliau Ffilm Optegol vs Ffoil

P'un a oes angen sêl optegol, glir neu sêlffilm ffoil alwminiwmi selio eich plât yn cael ei benderfynu gan eich fformat arbrofol.Ffilmiau selio optegolyn dryloyw i ganiatáu i chi arsylwi samplau, tra'n dal i'w diogelu ac atal anweddiad. Maent hefyd yn arbennig o ddefnyddiol mewn arbrofion qPCR sy'n golygu gwneud mesuriadau fflworoleuedd hynod fanwl gywir o'r plât, ac os felly bydd angen ffilm selio arnoch sy'n hidlo cyn lleied o fflworoleuedd â phosibl. Mae'n bwysig sicrhau bod y sêl neu'r cap rydych chi'n ei ddefnyddio yn ddigon clir i sicrhau bod y darlleniadau'n gywir.

Mae ffilmiau ffoil yn briodol ar gyfer unrhyw samplau sy'n sensitif i olau neu sydd i'w storio ar dymheredd is na 80°C. Am y rheswm hwn, bydd angen ffilm ffoil ar y rhan fwyaf o samplau y bwriedir eu storio am gyfnod hir. Mae ffilmiau ffoil hefyd yn dylladwy, sy'n ddefnyddiol ar gyfer naill ai archwilio ffynhonnau unigol, neu ar gyfer trosglwyddo samplau â nodwyddau. Gall hyn ddigwydd â llaw neu fel rhan o lwyfan robotig.

Ystyriwch hefyd y bydd angen sêl sy'n gallu gwrthsefyll sylweddau ymosodol sy'n cynnwys asidau, basau neu doddyddion, ac os felly mae sêl ffoil yn debygol o fod yn fwy priodol.

Gludiog vs Ffilm Selio Gwres
Morloi ffilm gludiogyn syml iawn ac yn hawdd eu cymhwyso. Y cyfan sydd ei angen yw i ddefnyddiwr roi'r sêl ar y plât, a defnyddio teclyn taenu syml i wasgu i lawr a ffurfio sêl dynn.

Mae morloi gwres yn fwy datblygedig, gan ddarparu sêl barhaol hirach sydd wedi lleihau cyfraddau anweddu o'i gymharu â sêl gludiog confensiynol. Mae'r opsiwn hwn yn briodol os ydych chi'n bwriadu storio samplau yn y tymor hir, er bod hyn yn dod â gofyniad ychwanegol ar gyfer offer selio plât.

Sut i Selio Plât PCR

Dull Selio Plât

Hunan-gludiog

1. Gwnewch yn siŵr eich bod yn gweithio ar wyneb gwaith gwastad a sefydlog

2. Tynnwch y ffilm o'i becynnu, a thynnwch y cefndir

3. Rhowch y sêl yn ofalus ar y plât, gan wneud yn siŵr bod pob un o'r ffynhonnau wedi'u gorchuddio

4. Defnyddiwch offeryn taenu i roi pwysau ar draws y plât. Dechreuwch o un pen a gweithio'ch ffordd draw i'r llall, gan wasgu'n gyfartal

5. Ailadroddwch hyn sawl gwaith

6. Rhedwch eich taenwr o amgylch y ffynhonnau allanol, i wneud yn siŵr bod y rhain hefyd wedi'u selio'n iawn.

Morloi Gwres

Mae seliau gwres yn gweithio trwy doddi'r ffilm i ymyl pob ffynnon, gyda chymorth seliwr plât. I weithredu seliwr gwres, cyfeiriwch at y cyfarwyddiadau a ddarperir gan wneuthurwr yr offer. Gwnewch yn siŵr bod gan y gwneuthurwr rydych chi'n dod o hyd i'ch offer ganddo enw da, oherwydd mae'n bwysig iawn bod y sêl yn gywir, yn effeithiol ac yn dal dŵr.

Syniadau Da Selio Platiau

a. Wrth roi pwysau ar y sêl, ewch i'r cyfeiriad llorweddol a fertigol i sicrhau sêl iawn

b. Mae bob amser yn arfer da cynnal rhediad prawf o beth bynnag yr ydych yn ei wneud, ac nid yw hyn yn ddim gwahanol gyda selio platiau. Profwch gyda phlât gwag cyn defnyddio un gyda samplau.

c. Wrth brofi, tynnwch y sêl ac edrychwch i weld bod y glud yn glynu'n iawn, heb unrhyw fylchau. Mae cynrychiolaeth weledol o hyn yn y ddogfen gyfeirio gyntaf. Os nad ydych wedi selio'r plât yn iawn, pan fyddwch chi'n tynnu'r sêl bydd bylchau lle nad yw'r glud wedi gwneud bond llawn i'r plât.

d. Ar gyfer cludo a chludo samplau, efallai y bydd yn ddefnyddiol gosod sêl blastig ar ben y sêl ffoil i gael amddiffyniad ychwanegol (yn enwedig rhag tyllu).

e. Gwnewch yn siŵr bob amser nad oes unrhyw lympiau na chrychau wrth osod y ffilm - bydd y rhain yn achosi gollyngiadau ac anweddiad