Zavedení
PCR destičky, které jsou po mnoho let základem laboratoří, se v moderním prostředí stávají ještě rozšířenějšími, protože laboratoře zvyšují svou propustnost a ve svých pracovních postupech stále více využívají automatizaci. Dosažení těchto cílů při zachování přesnosti a integrity experimentů může být obtížné. Jednou ze společných oblastí, kam se mohou vloudit chyby, je těsněníPCR destičkyse špatnou technikou, která umožňuje odpařování vzorků, mění pH a tím narušuje enzymatické funkce a vyvolává kontaminaci. Naučit se pečetit aPCR destičkasprávně tato rizika eliminuje a zajišťuje reprodukovatelné výsledky.
Najděte správné těsnění pro vaši PCR destičku
Uzávěry na talíře vs. filmové těsnění vs. víčka
Čepicejsou dobrým způsobem, jak utěsnit desku pevným utěsněním, a přitom vám stále poskytují flexibilitu velmi snadno odlepit a znovu utěsnit desku, jak potřebujete, bez jakéhokoli odpadu. Čepice však mají několik klíčových nevýhod.
Za prvé, budete si muset koupit specifickou krytku, která je kompatibilní, díky čemuž nejsou univerzální. Budete se muset ujistit, že víčko, které si vyberete, sedí na talíř, což závisí na jeho výrobci, a vyberte si buď klenutý nebo plochý podle termocykleru, který používáte.
Za druhé, nasazování uzávěrů na talíř může být velmi opakované a únavné, s rizikem křížové kontaminace, pokud nasadíte nesprávný uzávěr na špatnou jamku.
Zatímco filmové uzávěry jsou méně flexibilní, pokud jde o odstraňování a výměnu, jsou velmi univerzální, protože se hodí pro jakýkoli typ PCR destičky, bez ohledu na výrobce. Lze je jednoduše nařezat na požadovanou velikost, díky čemuž jsou velmi účinné.
Další možností je talířové víko. Ty nabízejí menší ochranu než uzávěry a těsnění a používají se hlavně pro krátkodobé krytí, aby se zabránilo kontaminaci.
Optické vs. fóliové těsnění
Ať už požadujete optické, čiré těsnění nebofólie z hliníkové fólieo utěsnění vaší desky rozhoduje váš experimentální formát.Optické těsnící fóliejsou průhledné, aby vám umožnily pozorovat vzorky a přitom je stále chránily a zabraňovaly vypařování. Jsou také zvláště užitečné v experimentech qPCR, které zahrnují provádění vysoce přesných měření fluorescence přímo z destičky, v takovém případě budete potřebovat těsnicí fólii, která odfiltruje co nejmenší fluorescenci. Je důležité se ujistit, že těsnění nebo víčko, které používáte, má dostatečně vysokou úroveň optické čistoty, aby byly údaje přesné.
Fóliové filmy jsou vhodné pro jakékoli vzorky, které jsou citlivé na světlo nebo mají být skladovány při teplotě nižší než 80 °C. Z tohoto důvodu bude většina vzorků určených k dlouhodobému skladování vyžadovat fólii. Fóliové filmy jsou také propíchatelné, což je užitečné buď pro zkoumání jednotlivých jamek, nebo pro přenos vzorků jehlami. K tomu může dojít ručně nebo jako součást robotické platformy.
Zvažte také, že agresivní látky, které zahrnují kyseliny, zásady nebo rozpouštědla, budou vyžadovat těsnění, které jim odolá, v takovém případě je pravděpodobně vhodnější těsnění fólií.
Lepidlo vs. Tepelně těsnící fólie
Lepicí fólie těsněníjsou velmi přímočaré a snadno se aplikují. Vše, co potřebujete, je, aby uživatel aplikoval těsnění na desku a pomocí jednoduchého aplikačního nástroje přitlačil a vytvořil těsné těsnění.
Tepelná těsnění jsou pokročilejší a poskytují těsnění s delší životností, které má sníženou rychlost odpařování ve srovnání s konvenčním lepicím těsněním. Tato možnost je vhodná, pokud chcete vzorky dlouhodobě skladovat, i když s tím přichází další požadavek na zařízení pro uzavírání desek.
Jak utěsnit PCR destičku
Způsob utěsnění desky
Samolepící
1. Ujistěte se, že pracujete na rovné a stabilní pracovní ploše
2. Vyjměte fólii z obalu a odstraňte podložku
3. Pečlivě umístěte těsnění na destičku a ujistěte se, že jsou všechny jamky zakryté
4. Pomocí aplikátoru aplikujte tlak na desku. Začněte od jednoho konce a postupujte k druhému, rovnoměrně přitlačte
5. Opakujte to mnohokrát
6. Projeďte aplikátorem kolem vnějších jamek, abyste se ujistili, že jsou také řádně utěsněny.
Tepelné těsnění
Tepelné spoje fungují tak, že se film přitaví k okraji každé jamky pomocí těsnícího plechu. Chcete-li používat tepelný svařovací stroj, postupujte podle pokynů dodaných výrobcem zařízení. Ujistěte se, že výrobce, od kterého odebíráte zařízení, je seriózní, protože je velmi důležité, aby těsnění bylo správné, účinné a vodotěsné.
Špičky pro těsnění desek
A. Při působení tlaku na těsnění postupujte v horizontálním i vertikálním směru, abyste zajistili správné utěsnění
b. Vždy je dobrým zvykem provést zkušební provoz čehokoli, co děláte, a nejinak je tomu u těsnění desek. Před použitím se vzorky otestujte prázdnou destičku.
C. Při testování sejměte těsnění a zkontrolujte, zda lepidlo přilnulo správně, bez mezer. V prvním referenčním dokumentu je to vizuální znázornění. Pokud jste desku řádně neutěsnili, po odstranění těsnění vzniknou mezery, kde se lepidlo plně nepřichytilo k desce.
d. Při zasílání a přepravě vzorků může být užitečné použít na horní stranu těsnění z fólie plastové těsnění pro extra ochranu (zejména před propíchnutím).
E. Vždy se ujistěte, že při nanášení fólie nejsou žádné hrbolky nebo vrásky – ty způsobí netěsnosti a vypařování
Čas odeslání: 23. listopadu 2022