Mikropipeta je pravděpodobně nejpoužívanějším nástrojem v laboratoři. Používají je vědci v celé řadě odvětví, včetně akademické obce, nemocnic a forenzních laboratoří, stejně jako ve vývoji léků a vakcín k přenosu přesných velmi malých množství kapalin.
I když může být nepříjemné a frustrující zpozorovat vzduchové bubliny ve špičce jednorázové pipety, pokud nejsou zaznamenány nebo ignorovány, může to mít obrovský dopad na spolehlivost a reprodukovatelnost výsledků.
Dobrou zprávou je, že existuje několik jednoduchých opatření, která můžete přijmout, abyste zabránili vzniku vzduchových bublin a zlepšili efektivitu laboratoře, spokojenost operátora a také přesnost a preciznost výsledků.
Níže prozkoumáme důsledek vzniku vzduchové bubliny ve špičce pipety a co byste měli dělat dále.
Důsledek bublin vPipetovací špička
I když používáte ty nejpřesnější, nejlepší z řady, dobře udržované, servisované a kalibrované pipety, spolehlivost vašich výsledků může být ovlivněna laboratorními chybami. Když se bubliny dostanou dotipmůže mít několik důsledků.
● Když uživatel zaznamená vzduchovou bublinu, musí věnovat čas náležitým dávkováním nasáté kapaliny, vysunout špičku a zahájit proces znovu.
● Nedetekované vzduchové bubliny mohou vést k malému přenosu objemu, a tím ke změně koncentrace reakčních směsí, což vede k neúspěšným experimentům a pochybným nebo nespolehlivým výsledkům.
Tyto výsledky mohou mít několik důsledků (1).
● Snížená efektivita laboratoře – Testy a testy se budou muset opakovat, což způsobí náklady na práci a materiál, které mohou být značné.
● Pochybné nebo nesprávné výsledky testu – Pokud jsou zveřejněny nesprávné výsledky, mohou to mít závažnější následky, včetně chybné diagnózy a špatných výsledků u pacienta.
● Stahování rukopisů z časopisů – Pokud se kolegům nepodaří replikovat vaše výsledky kvůli vzduchovým bublinám způsobujícím nepřesné výsledky, papíry mohou být staženy.
Nejlepší postupy, jak zabránit vzduchovým bublinám
Ve většině případů jsou vzduchové bubliny ve špičkách pipet způsobeny chybou obsluhy. Špatná technika v důsledku nedostatečného tréninku nebo únavy je obvykle základním problémem.
Pipetování je kvalifikovaná operace, která vyžaduje 110% pozornost, řádné školení a praxi k dosažení konzistentních a přesných výsledků.
I když existuje několik věcí, které můžete udělat pro snížení obecných chyb při pipetování, níže jsme zdůraznili některé osvědčené postupy, které lze použít, aby se zabránilo vzniku vzduchových bublin všpičky pipet.
Zlepšit uživatelskou techniku
Pipetujte pomalu
Pokud se píst při nasávání uvolní příliš rychle, mohou se do hrotu dostat vzduchové bubliny. To může být problematické zejména při přenosu viskózních kapalin. Podobný efekt může nastat, pokud se píst po výdeji uvolní příliš rychle.
Abyste se vyhnuli vzduchovým bublinám při nasávání, dbejte na to, abyste píst ručních pipet ovládali hladce a pravidelně a vyvíjejte konzistentní sílu.
Použijte správnou hloubku ponoření
Pokud špičku pipety neponoříte dostatečně hluboko pod meniskus nádržky na kapalinu, může dojít k nasátí vzduchu a tím k tvorbě bublin.
Ponoření špičky příliš hluboko však může v důsledku zvýšeného tlaku nasát více kapaliny nebo se na vnější straně špičky mohou objevit kapičky, takže je důležité ponořit špičkušpička pipetydo správné hloubky.
Doporučená hloubka se liší podle velikosti pipety, typu a značky. Zatímco doporučení výrobce by měla být dodržována, zde je obecný průvodce poskytnutý Národní fyzikální laboratoří.
Průvodce hloubkou ponoření špičky
Objem pipety (µl) a hloubka ponoření (mm)
- 1–100: 2–3
- 100 – 1 000: 2 – 4
- 1 000 – 5 000: 2 – 5
Pre-WetTipy na pipety
Při pipetování objemů větších než 10 µlšpičky pipetjsou obvykle předem zvlhčeny tak, že je několikrát naplníte dávkovanou kapalinou a vytlačíte ji do odpadu, aby se zlepšila přesnost.
Pokud je předem nenavlhčíte, může to mít za následek vzduchové bubliny, zejména při použití viskózních nebo hydrofobních kapalin. Abyste zabránili vzniku vzduchových bublin, zajistěte, abyste při pipetování objemu většího než 10 µl předem namočili špičky.
Pokud je to vhodné, použijte techniky reverzního pipetování
Viskózní látky: Častým problémem při pipetování viskózních látek, jako jsou roztoky proteinů nebo nukleových kyselin, glycerol a Tween 20/40/60/80, je častá tvorba bublin při použití techniky přímého pipetování.
Pomalé pipetování pomocí reverzní pipetovací techniky snižuje riziko tvorby bublin při přenosu viskózních roztoků.
Technika ELISA
Při pipetování malých objemů se také doporučuje zpětné pipetování96jamkové mikro testovací destičkypro techniky ELISA. Když jsou vzduchové bubliny nasávány do pipety nebo dávkovány do jamek při přidávání činidel, může to ovlivnit hodnoty optické hustoty a výsledky. Pro minimalizaci nebo odstranění tohoto problému se doporučuje zpětné pipetování.
Používejte ergonomické pipety
Pipety starého stylu, které nebyly navrženy s ohledem na ergonomii, vyžadují větší fyzickou námahu, jste unavení a vaše pipetovací technika se stává nedbalou a špatnou. Chyby uvedené výše, jako je rychlé uvolnění pístu, se mohou vyskytovat častěji.
Investicí do ergonomičtějšího řešení budete schopni zachovat vynikající techniku a zabránit tvorbě vzduchových bublin v důsledku špatné techniky.
Udělejte si čas na zaškolení personálu
Pravidelné školení a hodnocení personálu v pipetovacích technikách může zajistit, že se sníží chyby operátora a tvorba vzduchových bublin.
Zvažte více automatizovaných řešení
Jak je uvedeno výše, většinu vzduchových bublin způsobuje obsluha. Může být možné snížit chyby operátora a snížit pohodlí použitím elektronických pipet nebo flexibilní platformy pro manipulaci s kapalinami, jako je napřRobot pro manipulaci s kapalinami Agilent Bravo.
Použijte dobrou kvalituTipy na pipety
Mikropipety se obvykle kupují opatrně, ale často se málo myslí na kvalitu špičky jednorázové pipety. Vzhledem k vlivu, který má špička na výsledky pipetování, vyžaduje norma ISO 8655 zvláštní kalibraci, pokud jsou použity pipety a špičky od různých výrobců.
Může to být způsobeno tím, že mnoho levných hrotů může zpočátku vypadat dobře, ale když si je pečlivě prostudujete, mohou mít záblesky, výčnělky, škrábance a vzduchové bubliny nebo být ohnuté nebo obsahovat nečistoty.
Nákupem kvalitních špiček vyrobených z vysoce kvalitního polypropylenu můžete snížit výskyt vzduchových bublin.
Na závěr
Vniknutí vzduchových bublin do špičky pipety má dopad na efektivitu laboratoře a také na nepřesnost a nepřesnost výsledků. Zaznamenali jsme několik věcí, které můžete udělat, abyste zabránili vniknutí vzduchových bublin dovnitřšpička pipety.
Pokud však nekvalitníšpičky pipetzpůsobují, že se do špičky vaší pipety dostávají vzduchové bubliny, budete potěšeni, že naše univerzální fitkošpičky pipetjsou vyrobeny podle nejvyšších standardů a jsou vyrobeny z prvotřídního čistého polypropylenu.
Biomedicínská společnost Suzhou Aceprodukují vysoce kvalitní univerzální pipetové špičky o objemu 10, 20, 50, 100, 200, 300, 1000 a 1250 µl, 96 špiček/stojan. Výjimečná odolnost – všechny stojany na špičky ACE splňují požadavky na použití s vícekanálovými pipetami. Sterilní, filtrační, bez RNázy/DNázy a nepyrogenní.
Vítejte a zeptejte se nás na další podrobnosti.
Čas odeslání: 29. prosince 2022