Cryoviolisò cumunimenti utilizati per u almacenamentu di cristenici di linee di cellulare è altri materiali critichi, in critiche pieni di nitrogenu liquidu.

Ci hè parechji tappetti implicati in a cunservazione di successu di e cellule in nitrogenu liquidu. Mentre u principiu di basa hè un congelatu lento, a tecnica esatta impiegata dipende da u tipu di cellula è a crisa aduprata. Ci hè parechje cunsiderazioni di sicurità è i migliori pratichi per piglià in contu quandu almacenà e cellule in tali temperature bassa.

Questu post hà da scopu di dà una panoramica di quantu critichi sò almacenati in nitrogenu liquidu.

Chì sò cryviali

I Cryoviali sò picculi, cuciati di cipolle cuncipiti per almacenà mostre liquidi in temperature estremamente bassa. Assicuranu chì e cellule priservate in Crioprotett. Ùn entre micca in u cuntattu direttu cù u nitrogenu liquidu, minimizzendu u risicu di i frattuli cellulari mentre sò sempre benifiziu di u nitrogenu di u liquidu.

I viali sò generalmente dispunibili in una gamma di volumi è i disegni - ponu esse roscati internamente o esternamente cù fondu flat o arrotondatu. I formati sterili è non sterili sò ancu dispunibili.

Quale usaCyrovaliPer guardà e cellule in nitrogenu liquidu

Una gamma di laboratori NHS è privati ​​è l'istituzioni di ricerca specializazione in natura gardia, biologia epiteliale, immunologia è c cripuli.

Celecche priservate in questu modu cù e cellule di cellature B è t

Panoramica di cumu almacenà i crisiziunali in nitrogenu liquidu

A criopreserazione hè un prucessu chì preserva e cellule è altre custruzzioni biologiche di rinfrescà à e temperature assai bassa. I celluli ponu esse guardati in nitrogenu liquidu per anni senza perdita di una viabilità di a cellula. Questu hè un contorno di e prucedure impiegate.

Preparazione di a cellula

U metudu esattu per preparazione campammini varianu varià duremu da u tippu di a cellulare sò recullati è centrati di sviluppà una pellet ricca di Cell-Richera. Stu pellet hè allora resuspended in u supernatante mischju cù a cryoprotettante o un mediu di cronopreservazione.

Mediu di Cristofareervazione

Stu mediu hè impiegatu per preserva i celluli in insignamenti americani a in amabilità di bassa temperatura saranute e cose eccessivi è dunque a morte di a cellulare. U so rolu hè di furnisce un ambiente sicuru, prutettivu per e cellule è i tessuti durante a congelazione, u almacenamentu è scossi prucessi.

Un mediu cum'è l'impegnu frescu (FFP), suluzione plasmalyte o di serm-gratis, suluzioni senza crisi

U Pellet di Sample Re-Liquifed hè alequotatu in pulizza di polipropilene cum'èViali di riparizioni biomudici di Suzhou Asce.

Hè impurtante micca di rimpiazzà i critichi cum'è questu aumenterà u risicu di cracking è a pussibile liberazione di u cuntenutu (1).

Tarifa di congelazione cuntrullata

In generale, una ratezza di congelazione controlata lenta hè impiegata per a criptreserazione di crisi di successu.

Dopu i campioni sò alliati in viali criogenici, sò posti nantu à u ghiaccio umitu o in un frigorifero di 4 ℃ è a prucedura di a congelazione hè iniziata à 5 minuti. Cum'è una guida generale, e cellule sò rinfrescate à una tarifa di -1 à -3 per minutu (2). Questu hè ottenutu utilizendu un più fretu programabile o mettendu viali in una casella insulata posta in un -70 ° C à -90 ° TATALE TATELLU CREMOLAT.

Trasferitu à Nitrogenu liquidu

I vii cronogeni congelati sò trasferiti à un tank di nitrogenu liquidu per i periodi indefiniti furnite una temperatura di menu di -135 ℃ hè mantinutu.

Queste temperature ultra-bassa ponu esse uttenuti per immersione in u liquidu o di fasa di fase di vapore.

Fase di liquidu o di vapore?

U almacenamentu in Fase Liquidu Nitrogenu hè cunnisciutu per mantene a temperatura fredda cun cuerenza assoluta, ma hè spessu micca cunsigliata per i seguenti motivi:

• A necessità di grandi volumi (prufundità) di nitrogenu liquidu chì hè un periculu potenziale. Burns o asfissia per questu hè un veru risicu.
• Case di documentità di cuntaminazione incetta da agenti infettivi cum'è ASPERGILLUS, hep b è virale, via u nitrogenu liquidu (2,3)
• U putenziale di nitrogenu liquidu per filtrà in i viali durante l'immersione. Quandu hà rimessu da u almacenamentu è rinfriscà a temperatura ambienti, u nitrogenu espande rapidamente. In cunseguenza, u vial pò sparisce quandu era cacciatu da u almacenamentu di nitrogen liquidu, creendu un periculu da i dannucci di i dui volanti è l'esposizione à u cuntenutu (1, 4).

Per questi mutivi, u almacenamentu di temperatura Ultra-bassa hè più cumunemente in u nitrogenu di fasa di vapore. Quandu i campioni anu da esse guardatu in a fasa liquida, a tubula di cryflex specializata deve esse aduprate.

U fondu à a fasa di a vapore hè chì un gradiente di temperatura verticale pò accade in u risultatu di fluctuazioni di temperatura trà -135 ℃ è -190 ℃. Questu fecundà un monitoraghju currettu è diligente di i livelli nitrogeni liquidi è variazioni di tempesta (5).

Parechji fabricatori cunsigliatu chì i crisioli sò adattati per almacenamiento à -135 ℃ o per aduprà solu a fase di vapor.

Scongelendu e vostre cellule cryprescenti

A prurezzione di scaccia hè stressante per una cultura congelata, è a manizzanza è a tecnica è tecnica è tecnica è tecnica ottima viabilità, ricurezzione, è funziunalità di e celle. I protokolli di scossa esatta dependeranu i tipi di cellule specifici. Tuttavia, rapidu sbulicatu hè cunsideratu standard à:

• Diminuite ogni impattu nantu à a ricuperazione cellulare
• Aiutate à riduce u tempu di l'esposizione à i solizioni prisenti in i media di a congelazione
• Minimizà ogni danni da a recristallazione di ghiaccio

Bagni d'acqua, bagni di bagnu, o strumenti automatizati specializati sò cumunimenti utilizati per scumpientà i mostri.

A più frequenza 1 a linea di a cellulare hè sbulicata in tempu di 1-2 minuti, pè u bagnu di acqua dolce finu à ch'ella ci hè solu un mediu di crescita predichja.

Per certi celluli cum'è l'Ambrigianu Miliani, u caldu Cantu hè essenziale per a so survival.

E celle sò avà preparati, e voli cellulari, o in u casu di e celluli di stema di Haematopifici - Studi di Vicicletta per a tiruci di e celle di donatore prima.

Hè pratica nurmale per piglià picculi aliquoti di a mostra presetata utilizata per eseguisce una cellula per determinà cuncentrazioni di cellulari per a piuma in cultura. Pudete dopu valutà i risultati di e prucedure di l'isulazione di e cellula è determinà a viabilità.

I migliori pratichi per u almacenamentu di Cryviali

U successu crypreservazione di mostri hà almacendore in cristoli dipende da assai elementi, chì includenu una protolistazione adatta.

• Cellule divisu trà i lochi di almacenamentu- Se i volumi permettenu, e cellule divisi trà viali è guardà in i lochi separati per riduce u risicu di perdita di mostra per fallimenti d'equipaggiu.
• Impedisce a contaminazione cross- Optate per i vials criogenichi sterili o autoclavi in ​​un autoclave
• Aduprate viali appropriatamente i viali per e vostre cellule- Vials venenu in una gamma di volumi trà 1 è 5mls. Evitate i vials overfilling per riduce u risicu di cracking.
• Selezziunate i vial crondi di crapenicu internu o esternamente- Viali lampati internamente per alcune università per misure di sicurezza - Puderanu ancu impedisce a contaminazione durante a riempimentu o quandu almacenatu in u nitrogenu liquidu.
• Impedisce a fuga- Utilizate i sementi bi-injected in u veloce o di u vite o o-ring per impedisce u filtru è a contaminazione.
• Aduprate 2D Barcodes è l'etichettà i vials- Per assicurà a tacibilità, vials cù grandi aree di scrittura attivate ogni vial per esse etichettatu. I barcodi 2d ponu aiutà cù a guardia di almacenamento è registranu. I tappi codificati di u culore sò utili per identificazione più faciule.
• Mantenimentu di almacenamentu adatti- Per assicurà e cellule ùn sò micca persu, i navi di almacenamentu duverà monitorà constantemente a temperatura è liquidi nitrogenu nitrogeni. L'allarmi deve esse adattati per alert utilizatori di errori.

Precauzioni di sicurità

U nitrogenu liquidu hè diventatu pratica cumuni in a ricerca muderna ma porta u risicu di ferite gravi se usate sbagliatu.

L'equipaggiu protettivu persunale (PPE) deve esse purtatu à minimizà u risicu di frosculi, brusgiate è altri incidenti avversi quandu manipulanu nitrogenu liquidu. Vestitu

• Guanti criogenichi
• Stem di laboratoriu
• Impattu resistente a scudatura completa chì copre ancu u collu
• Scarpi chjusi
• Apron di plastica splashProof

I frigoriferi liquidi sò stati posti in zoni ben ventilati per minimizà u risicu di l'asfissia - scappò di u nitrogenu vaporizeghja è spulga l'ossigenu atmosferica. I grandi magazzini volti duveranu avè sistemi di alarme di ossigenu.

U travagliu in coppia, quandu manipulà u nitrogenu liquidu hè ideale è u so usu fora di l'ore di travagliu nurmale deve esse pruibitu.

Cryovials per sustene u vostru flussu di travagliu

A sucità biomedica Suzhou Ace offre una selezzione larga di prudutti chì si scontranu a vostra crypreservazione necessaria per diverse tippi di cellule. U Portfolio include una gamma di tubi bè cum'è una gamma di critica sterile.

I nostri criteri sò:

• Labbra di labbra capre 0.5ml 1,0mm 1,0ml Cryogenic Cryogenic Cryogenicu Cryogenicu Cryotube Cryotube cù a Gasket

  ● 0,5ml, 1,5ml, a specificazione 2.0mmica, cù falda o senza falda
  ● Disegno Còmicu o Self Standing, sterile o non-sterile sò tramindui dispunibili
  ● I tubi di capre di viti sò fatti di polypropilene medica medica
  ● PP Chyotube Vials pò esse ripetutamente congelati è tìtu
  ● U disignu di u Capu esternu pò riduce a probabilità di contaminazione durante u trattamentu di mostra.
  ● Stew Cap Cryogenic Tubes Screw Universals Universale per l'usu
  ● I tubi si adattanu à i rotori più cumuni
  ● Tube Cryogenic O-Ring Tubes Fit Standard 1-Inch è 2-Inch, 48Well, 91well è 1001welly free boxe
  ● Autoclavu per 121 ° C è congelata à -86 ° C

  Parte no	Materiale	Volume	CappaCulore	PCI /Borsa	Bors / Casu
  Act05-bl-n	PP	0,5ml	Nero, giallo, blu, rossu, viola, bianco	500	10
  Act15 - Bl-N	PP	1,5ml	Nero, giallo, blu, rossu, viola, bianco	500	10
  Act15-BL-NW	PP	1,5ml	Nero, giallo, blu, rossu, viola, bianco	500	10
  ACT20-BL-n	PP	2,0ml	Nero, giallo, blu, rossu, viola, bianco	500	10