Cumu Pipettà Picculi Volumi cù Pipette Manuali Handheld

Siccomu ci hè più focu annantu à a riduzione di i reagenti è di i costi, i volumi più chjuchi sò in alta dumanda, per esempiu, per a preparazione di PCR Mastermix o reazzione enzimatica. Mais le pipetage de petits volumes de 0,2 à 5 µL pose de nouveaux défis pour l'exactitude et la précision du pipetage. I punti seguenti sò essenziali:

1. Pipetta è dimensione di punta: sceglite sempre a pipetta cù u voluminu nominale più bassu pussibule è a punta più chjuca per mantene u cuscino d'aria u più chjucu pussibule. Per pipettare 1 µL, ad esempio, scegliere una pipetta da 0,25 – 2,5 µL e una punta corrispondente invece di una pipetta da 1 – 10 µL.
2. Calibrazione è mantenimentu: Hè essenziale chì e vostre pipette sò correttamente calibrate è mantenute. Picculi aghjustamenti è pezzi rotti nantu à una pipetta portanu à un aumentu massivu di i valori d'errore sistematicu è aleatoriu. Una calibrazione secondu ISO 8655 deve esse realizatu una volta à l'annu.
3. Pipette di spustamentu pusitivu: Verificate s'ellu avete una pipette di spustamentu pusitivu cù una gamma di vulume bassu in u vostru laboratoriu. En général, l'utilisation de ce type de pipette conduit à un meilleur résultat de pipetage en termes d'exactitude et de précision qu'avec les pipettes classiques à coussin d'air.
4. Pruvate d'utilizà volumi più grande: Pudete cunsiderà diluting u vostru campione per pipette volumi più grande cù a listessa quantità in a reazione finale. Questu pò riduce l'errore di pipetting cù volumi di mostra assai chjuchi.

In più di un bonu strumentu, u circadoru deve avè una tecnica di pipetting assai bona. Prestate una attenzione particulare à i seguenti passi:

1. Fixation de la pointe : non infiltrer la pipette sur la pointe car cela pourrait endommager l'extrémité de la pointe fine et provoquer le redirection du faisceau de liquide ou endommager l'orifice. Applicà una pressione ligera solu quandu attachete una punta è utilizate una pipetta cù un conu di punta à molla.
2. Tenendu a pipetta: Ùn tenete micca a pipetta in manu mentre aspettate a centrifuga, u cycler, etc. L'internu di a pipetta si riscalda è porta u cuscinettu d'aria per espansione, risultatu in deviazioni da u voluminu stabilitu quandu pipetta.
3. Pré-mouillage : L'humidification de l'air à l'intérieur de la pointe et de la pipette prépare la pointe pour l'échantillon et évite l'évaporation lors de l'aspiration du volume de transfert.
4. Aspirazione verticale: Questu hè assai impurtante quandu manipule picculi volumi per evità l'effettu capillare chì si trova quandu a pipette hè tenuta in un angulu.
5. Profundità di immersione: Immerse a punta u più pocu pussibule per impedisce chì u liquidu entre in a punta per via di l'effettu capillare. Regola di u polgaru: più chjuca hè a punta è u voluminu, più bassa hè a prufundità di immersione. Si consiglia un massimo di 2 mm quando si pipettano piccoli volumi.
6. Distribuzione à un angulu di 45 °: U flussu ottimale di u liquidu hè garantitu quandu a pipette hè tenuta à un angulu di 45 °.
7. Cuntattu à u muru di u vasu o a superficia di u liquidu: i picculi volumi ponu esse dispensati solu quandu a punta hè tenuta contru à u muru di u vasu, o immersa in u liquidu. Ancu l'ultima goccia da a punta pò esse dispensata cù precisione.
8. Blow-out: Un soffiu hè ubligatoriu dopu a dispensazione di volumi bassi per dispensa ancu l'ultima goccia di liquidu presente in a punta. U soffiu deve ancu esse realizatu contr'à u muru di u vasu. Attenti à ùn portà bolle d'aria in u campione quandu eseguite un soffiu à a superficia di u liquidu.