CryovialsKasagaran nga gigamit alang sa cryogenic nga pagtipig sa mga linya sa cell ug uban pang mga kritikal nga mga materyal nga biolohikal, sa mga Dewars nga puno sa likido nga nitroheno.

Adunay daghang mga yugto nga nahilambigit sa malampuson nga pagpreserbar sa mga selyula sa likido nga nitroheno. Samtang ang sukaranang prinsipyo usa ka hinay nga pag-freeze, ang eksaktong pamaagi sa teknik nag-agad sa tipo sa cell type ug cryoprotecttttt. Adunay daghang mga konsiderasyon sa kahilwasan ug labing kaayo nga mga gawi nga tagdon kung ang pagtipig sa mga selyula sa ingon nga low temperatura.

Tumong sa kini nga post nga maghatag usa ka kinatibuk-an kung giunsa ang pagtipig sa mga Cryovials sa likido nga nitroheno.

Unsa ang mga cryovial

Gamay ang mga cryovial, mga panaksan nga gidisenyo alang sa pagtipig sa mga sample nga likido sa labing ubos nga temperatura. Gisiguro nila nga ang mga selyula nga gitipigan sa Cryoprotectt wala magtan-aw sa direkta nga kontak sa likido nga nitroheno, pagminus sa peligro sa mga cellular fracture samtang nakabenepisyo sa epekto sa likido nga nitroheno.

Ang mga panaksan kasagaran magamit sa usa ka lainlaing mga volume ug laraw - mahimo kini nga internal o externally nga gilakip sa mga flat o rounded bottoms. Ang mga format nga dili maayo nga mga format magamit usab.

Kinsa ang naggamitMga cyrovialsa pagtipig mga selyula sa likido nga nitroheno

Usa ka lainlaing mga laboratoryo sa NHS ug pribado usab nga mga institusyon sa panukiduki nga espesyalista sa banking sa cord Doods, Imithelial Cell Biology, Immunology Cell Biology sa Cryopreve Gurgs.

Cells preserved in this way include B and T Cells, CHO Cells, Hematopoietic Stem and Progenitor Cells, Hybridomas, Intestinal Cells, Macrophages, Mesenchymal Stem and Progenitor Cells, Monocytes, Myeloma, NK Cells and Pluripotent Stem Cells.

PARA SA PAGTUON KON UNSAON PAGPANGITA SA CRYOVLIALS SA LIQUID NITROGEN

Ang Cryoprevation usa ka proseso nga nagpreserbar sa mga selyula ug uban pang mga biological nga mga konstruksyon pinaagi sa pagpabugnaw kanila sa ubos nga temperatura. Ang mga cell mahimong gitipig sa likido nga nitroheno sa daghang mga tuig nga wala'y pagkawala sa cell viability. Kini usa ka outline sa mga pamaagi nga gigamit.

Pag-andam sa cell

Ang tukma nga pamaagi alang sa pag-andam sa mga sample magkalainlain depende sa tipo sa selyula, apan sa kinatibuk-an, ang mga selyula nakolekta ug nagpalambo sa usa ka pellet nga puno sa cell. Kini nga pellet dayon resuspended sa supernatant nga gisagol sa cryoprotectt o usa ka medium nga cryoprevervation.

Medium nga Sryopresvation

Ang kini nga medium gigamit aron mapreserbar ang mga selyula sa mga low-temperatura nga mga palibot nga kini ipailalom sa pagpakita sa pagporma sa mga intra ug extracellular crystals ug busa kamatayon. Ang ilang tahas mao ang paghatag usa ka luwas, pagpanalipod sa palibot alang sa mga selyula ug tisyu sa panahon sa pagyeyelo, pagtipig, ug mga proseso sa pagtipig.

Ang usa ka medium sama sa lab-as nga frozen plasma (FFP), heParinised nga solusyon nga plasmalyte o serum nga libre sa mga solusyon sa DMOTYLS (DMSEROL

Ang gi-re-liquied sample nga pellet gi-diiquot sa polypropylene cryovial sama saSuzhou Ace Biomedical Company ChieGOGENT SPACET VIALS.

Mahinungdanon nga dili sobra sa pag-agaw sa mga cryovials tungod kay madugangan kini nga risgo sa pag-crack ug ang posible nga pagpagawas sa sulud (1).

Kontrol nga rate sa Freeze

Sa kinatibuk-an, ang usa ka hinay nga pagkontrol nga rate sa freeze nga gigamit alang sa malampuson nga pagtuis sa mga selyula.

Pagkahuman sa mga sampol nga gi-diiquot sa mga panaksan nga mga panaksan, gibutang sila sa basa nga yelo o sa usa ka 4 ℃ refrigerator ug gisugdan ang pamaagi sa pagyeyelo sa sulod sa 5 ka minuto. Ingon usa ka kinatibuk-ang giya, ang mga selyula gipabugnaw sa usa ka rate nga -1 hangtod -3 matag minuto (2). Nakab-ot kini gamit ang usa ka programmable cooler o pinaagi sa pagbutang sa mga panaksan sa usa ka insulated box nga gibutang sa usa ka -70 ° C nga kontrolado rate freezer.

Pagbalhin sa likido nga nitroheno

Ang mga nagyelo nga mga panaksan nga cryogenic dayon gibalhin sa usa ka likido nga tangke sa nitrogen alang sa dili tinuyo nga mga panahon nga naghatag usa ka temperatura nga mas gamay sa -135 ℃ gipadayon.

Kini nga mga ultra-low temperatura mahimong makuha pinaagi sa pagpaunlod sa likido o singaw hugna nitrohogen.

Likido o singaw nga yugto?

Ang pagtipig sa liquid phase nitrogen nailhan nga magpadayon sa bugnaw nga temperatura nga adunay hingpit nga pagkamakanunayon, apan kanunay dili girekomenda sa mga mosunud nga mga hinungdan:

• Ang panginahanglan alang sa daghang mga volume (giladmon) sa likido nga nitroheno nga usa ka potensyal nga peligro. Ang pagkasunog o asphyxiation tungod niini usa ka tinuod nga peligro.
• Gisulat nga mga kaso sa cross-cross kontaminasyon pinaagi sa mga makatakod nga ahente sama sa Aspergillus, HEP B ug Viral nga mikaylap pinaagi sa likido nga nitrogen medium (2,3)
• Ang potensyal alang sa likido nga nitroheno nga motulo sa mga panaksan sa panahon sa pagpaunlod. Kung gikuha gikan sa pagtipig ug gipainit sa temperatura sa kwarto, ang nitroheno paspas nga nagpalapad. Tungod niini, ang panaksan mahimong maguba kung makuha gikan sa likido nga pagtipig sa nitrogen, paghimo og peligro gikan sa mga nagalupad nga basura ug pagkaladlad sa sulud (1, 4).

Alang sa kini nga mga hinungdan, ang ultra-Ultra-Ultra-Lower temperatura nga pagtipig kasagaran sa Vapor Phase Nitrogen. Kung ang mga sampol kinahanglan nga gitipig sa likido nga yugto, kinahanglan gamiton ang espesyalista nga croflex tubing.

Ang pagpaubos sa bahin sa singaw mao nga ang usa ka bertikal nga temperatura nga gradient mahimong mahitabo nga miresulta sa pagbag-o sa temperatura tali sa -135 ℃ ug -190 ℃. Gikinahanglan kini nga mabinantayon ug makugihon nga pag-monitor sa mga lebel sa likido nga nitroheno ug mga kalainan sa temperatura (5).

Daghang mga tiggama ang girekomenda nga ang mga chiovials angay alang sa pagtipig hangtod sa -135 ℃ o alang sa paggamit lamang sa singaw nga hugna lamang.

Pagtunaw sa imong mga cryopresreved cells

Ang pamaagi sa pagtunaw puno sa usa ka nagyelo nga kultura, ug ang husto nga pagdumala ug teknik gikinahanglan aron masiguro ang kamalaumon nga pagkaayo, pagkaayo, ug pag-andar sa mga selyula. Ang eksakto nga pagtunaw nga mga protocols magdepende sa piho nga mga tipo sa selyula. Bisan pa, ang paspas nga pagtunaw giisip nga sumbanan sa:

• Pagminus sa bisan unsang epekto sa pagkaayo sa cellular
• Tabangi ang pagpakunhod sa oras sa pagkaladlad sa mga solute nga naa sa nagyelo nga media
• Pagminus sa bisan unsang kadaot sa Ice Recrystallisasyon

Ang mga kaligoanan sa tubig, mga kaligoanan sa tubig, o mga espesyalista nga awtomatik nga mga instrumento sagad nga gigamit sa mga sample nga sample.

Labing kanunay nga 1 nga linya sa cell ang natuyok sa usa ka oras alang sa 1-2 ka minuto, pinaagi sa hinay nga pag-agay sa usa ka 37 nga naligo sa yelo sa wala pa sila nahugasan sa usa ka medium nga gipadako sa usa ka medium nga pag-uswag sa usa ka medium nga pag-uswag sa usa ka medium sa pagtubo.

Alang sa pipila ka mga selyula sama sa mga embryo sa Mammalian, ang hinay nga pag-init hinungdanon alang sa ilang pagkaluwas.

Andam na ang mga selyula alang sa kultura sa cell, pag-inusara sa cell, o sa kaso sa mga cell sa haematopoietic - mga pagtuon sa VIALILE aron garantiya ang integridad sa mga donor nga stem cells sa wala pa myeloablative therapy.

Normal kini nga batasan sa pagkuha sa gagmay nga mga aliquoto sa prewashed sample nga gigamit sa paghimo sa usa ka cell count aron mahibal-an ang mga konsentrasyon sa cell alang sa pagkanaug sa kultura. Mahimo nimo nga susihon ang mga sangputanan sa mga pamaagi sa pagkalain sa selyula ug pagtino sa cell viability.

Labing kaayo nga mga buhat alang sa pagtipig sa mga cryovials

Ang malampuson nga pag-cryoprevation sa mga sample nga gitipigan sa mga cryovials nagdepende sa daghang mga elemento sa protocol lakip ang husto nga pagtipig ug pagtipig sa rekord.

• Split cells tali sa mga lokasyon sa pagtipig- Kung gitugotan ang mga volume, split cells tali sa mga panaksan ug tipigi sila sa lainlaing mga lokasyon aron makunhuran ang peligro sa mga sample nga kapildihan tungod sa mga kapakyasan sa kagamitan.
• Paglikay sa kontaminasyon sa krus- Pagpili alang sa usa nga gigamit nga Sterile Cryogenic Vials o Autoclave sa wala pa ang sunud-sunod nga paggamit
• Paggamit og tukma nga kadako nga mga panaksan alang sa imong mga selyula- Ang mga panaksan moabut sa usa ka lainlaing mga volume tali sa 1 ug 5mls. Paglikay sa mga overfilling nga mga panaksan aron makunhuran ang risgo sa pag-crack.
• Pilia ang Internal o Externally Threaded Cryogenic Vials- Ang mga sulud sa sulud sa sulud girekomenda sa pipila nga mga unibersidad alang sa mga lakang sa kaluwasan - mahimo usab nila mapugngan ang kontaminasyon sa pagpuno o kung gitipigan sa likido nga nitroheno.
• Paglikay sa pagtulo- Paggamit mga bi-injected seals nga gihulma sa screw-cap o o-singsing aron malikayan ang pagtulo ug kontaminasyon.
• Paggamit 2D barcodes ug mga panaksan nga label- Aron masiguro ang mga lit-ag, ang mga panaksan nga adunay daghang mga lugar nga gisulat nakapahimo sa matag panaksan nga igo nga gimarkahan. Ang 2D barcodes makatabang sa pagdumala sa pagtipig ug pagtipig sa rekord. Ang mga color nga coded cap mapuslanon alang sa dali nga pag-ila.
• Igo nga pag-amping sa pagtipig- Aron masiguro ang mga cells dili mawala, ang mga sudlanan sa pagtipig kinahanglan kanunay nga mag-monitor sa lebel sa temperatura ug likido nga nitroheno. Ang mga Alarm kinahanglan nga haom sa mga alerto sa mga tiggamit sa mga sayup.

Pag-amping sa Kaluwas

Ang likido nga nitroheno nahimong sagad nga praktis sa modernong panukiduki apan nagdala sa risgo sa grabe nga kadaot kung gigamit nga dili husto.

Ang husto nga personal nga kagamitan sa pagpanalipod (PPE) kinahanglan nga magsul-ob aron maminusan ang peligro sa katugnaw, pagsunog ug uban pang mga dili maayo nga mga insidente sa pagdumala sa likido nga nitroheno. Sul-obon

• Gwantes gwantes
• Sinina sa laboratoryo
• Ang epekto makapugong sa tibuuk nga nawong sa nawong nga naglangkob usab sa liog
• SIRED-TOE SHOES
• Splashproof plastic apron

Ang mga liquid nitrogen refrigerator kinahanglan ibutang sa maayo nga mga bentilasyon nga mga lugar aron maibanan ang peligro sa asphyxiation - nakaikyas ang nitroheno nga oxygen. Daghang mga tindahan sa volume kinahanglan adunay mubu nga mga sistema sa alarm sa oxygen.

Ang pagtrabaho nga nagtinagurha kung ang pagdumala sa likido nga nitroheno mao ang sulundon ug ang paggamit niini sa gawas sa normal nga oras sa pagtrabaho kinahanglan nga gidili.

Cryovials aron suportahan ang imong workflow

Si Suzhou Ace Biomedical Company nagtanyag usa ka halapad nga pagpili sa mga produkto nga nakatagbo sa imong pag-cryoprevervation alang sa lainlaing mga lahi sa mga selyula. Ang portfolio naglakip sa usa ka lainlaing mga tubesas ingon usa ka lainlaing mga sterile cryovials.

Ang among mga cryovials mao ang:

• Lab Screw Cap 0.5ml 1.5ml 2.0ml Cryovial Cryovial Cryogenic Vials Conical Bottom Cryotube nga adunay gasket

  ● 0.5ml, 1.5ml, 2.0ml nga detalye, nga adunay sidsid o wala'y sidsid
  ● Ang laraw o kaugalingon nga laraw sa kaugalingon, sterile o non-sterile parehas nga magamit
  ● Ang mga tubo sa screw cap gihimo sa medical grade polypropylene
  ● Ang mga panaksan sa PP Cryotube mahimo nga balik-balik nga nagyelo ug matunaw
  ● Ang laraw sa gawas nga cap mahimong makunhuran ang kalagmitan sa kontaminasyon sa panahon sa Sample nga pagtambal.
  ● Screw Cap Cryogenic Tubes Universal Screw Threads aron magamit
  ● Ang mga tubo angay nga labing kasagaran nga mga rotors
  ● Cryogenic tube o-singsing nga mga tubo nga angay sa standard 1-pulgada, 2-pulgada, 48well, 81well ug 1006well ug 100well ug 100well nga mga kahon sa freezer
  ● Aapiclanal nga hangtod sa 121 ° C ug FREEZALED TO -86 ° C

  BAHIN NO	Materyal	Libro	KaloriBulok	PC /Bag	Mga Bag / Kaso
  ACT05-BL-N	PP	0.5ml	Itom, dilaw, asul, pula, purpura, puti	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ml	Itom, dilaw, asul, pula, purpura, puti	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5ml	Itom, dilaw, asul, pula, purpura, puti	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ml	Itom, dilaw, asul, pula, purpura, puti	500	10