Kung ang mga volume sa pipetting gikan sa 0.2 hangtod 5 µL, ang katukma ug katukma sa pipetting labing hinungdanon usa ka maayo nga teknik sa pipetting hinungdanon tungod kay ang mga sayup sa pagdumala mas klaro sa gagmay nga mga volume.
Ingon nga dugang nga pagtutok ang gibutang sa pagkunhod sa mga reagents ug gasto, ang gagmay nga mga volume adunay taas nga panginahanglan, pananglitan, alang sa pag-andam sa PCR Mastermix o mga reaksyon sa enzyme. Apan ang pagpipet sa gagmay nga mga volume gikan sa 0.2 - 5 µL nagtakda ug bag-ong mga hagit alang sa katukma ug katukma sa pipetting. Importante ang mosunod nga mga punto:
- Pipette ug gidak-on sa tip: Pilia kanunay ang pipette nga adunay pinakagamay nga gidaghanon nga posible ug ang pinakagamay nga tip aron magpabilin nga gamay ang air cushion kutob sa mahimo. Sa pagpipette og 1 µL eg, pagpili og 0.25 – 2.5 µL pipette ug matching tip kay sa 1 – 10 µL pipette.
- Pag-calibrate ug pagmentinar: Importante nga ang imong mga pipette hustong na-calibrate ug mamentinar. Ang gagmay nga mga pag-adjust ug nabuak nga mga bahin sa usa ka pipette nagdala sa usa ka dako nga pagtaas sa sistematiko ug random nga mga kantidad sa sayup. Ang pag-calibrate sumala sa ISO 8655 kinahanglan himuon kausa sa usa ka tuig.
- Positibo nga displacement pipette: Susiha kung ikaw adunay positibo nga displacement pipette nga adunay gamay nga gidaghanon sa gidaghanon sa imong lab. Sa kinatibuk-an, ang paggamit niini nga matang sa pipette mosangpot sa usa ka mas maayo nga resulta sa pipetting sa mga termino sa katukma ug katukma kay sa classic air-cushion pipettes.
- Sulayi ang paggamit sa mas dagkong mga volume: Mahimo nimong ikonsiderar ang pagtunaw sa imong sample aron mag-pipette sa mas dagkong mga volume nga adunay parehas nga gidaghanon sa katapusang reaksyon. Kini makapakunhod sa mga sayup sa pipetting nga adunay gamay kaayo nga gidaghanon sa sample.
Dugang pa sa usa ka maayo nga himan, ang tigdukiduki kinahanglan adunay usa ka maayo kaayo nga teknik sa pipetting. Hatagi og espesyal nga pagtagad ang mosunod nga mga lakang:
- Tip attachment: Ayaw i-jam ang pipette ngadto sa tumoy kay kini makadaot sa pinong tumoy sa tumoy hinungdan nga ang liquid beam ma-redirect o makadaut sa orifice. Gamita lang ang gaan nga presyur kung magtaod ug tip ug gamita ang pipette nga adunay spring-loaded tip cone.
- Pagkupot sa pipette: Ayaw paggunit sa pipette sa imong kamot samtang naghulat sa centrifuge, cycler, ug uban pa. Ang sulod sa pipette moinit ug modala sa air cushion sa pagpalapad nga moresulta sa mga pagtipas gikan sa gitakda nga gidaghanon sa dihang pipetting.
- Pre-wetting: Ang humidification sa hangin sa sulod sa tip ug pipette nag-andam sa tumoy alang sa sample ug naglikay sa pag-alisngaw sa dihang nag-aspirar sa gidaghanon sa pagbalhin.
- Bertikal nga pangandoy: Kini mao ang importante kaayo sa diha nga ang pagdumala sa gagmay nga mga volume sa paglikay sa capillary epekto nga mahitabo sa diha nga ang pipette gigunitan sa usa ka anggulo.
- Ang giladmon sa pagpaunlod: Ilublob ang tumoy kutob sa mahimo aron mapugngan ang pagsulod sa likido sa tumoy tungod sa epekto sa capillary. Rule of thumb: Kon mas gamay ang tumoy ug volume, mas ubos ang giladmon sa pagpaunlod. Girekomenda namon ang labing taas nga 2 mm kung ang pag-pipet sa gagmay nga mga volume.
- Pag-apod-apod sa 45° nga anggulo: Ang labing maayo nga pag-agos sa likido gigarantiyahan kung ang pipette ibutang sa usa ka anggulo nga 45 °.
- Pagkontak sa bungbong sa sudlanan o likido nga nawong: Ang gagmay nga mga volume mahimo ra nga ipanghatag sa husto kung ang tumoy gigunitan sa dingding sa sudlanan, o giunlod sa likido. Bisan ang katapusan nga pagtulo gikan sa tumoy mahimong mahatag nga tukma.
- Blow-out: Ang usa ka blow-out mao ang mandatory human sa dispensing ubos nga volume sa dispense bisan ang katapusan nga tulo sa liquid anaa sa tumoy. Ang pagbuto kinahanglan usab nga himuon batok sa dingding sa sudlanan. Pag-amping nga dili magdala og mga bula sa hangin ngadto sa sample kung maghimo og blow-out sa liquid surface.
Oras sa pag-post: Peb-18-2021