Com segellar una placa PCR

Presentació

Plaques PCR, una base del laboratori durant molts anys, es fa encara més prevalent en el marc modern, ja que els laboratoris augmenten el seu rendiment i utilitzen cada cop més automatització dins dels seus fluxos de treball. Assolir aquests objectius alhora que preservar la precisió i la integritat dels experiments pot ser difícil. Una de les zones comunes on es poden arrossegar els errors és amb el segellat dePlaques PCR, amb una mala tècnica que permet l’evaporació de mostres, alterant el pH i per tant pertorbant les funcions enzimàtiques i convidant la contaminació. Aprendre a segellar unPlaca PCRElimina correctament aquests riscos i assegura resultats reproduïbles.

Cerqueu el segell adequat per a la vostra placa PCR

Caps de plaques contra segells de cinema vs.
TapsSón una bona manera de segellar la placa amb un segell ajustat, tot i que us proporciona la flexibilitat per desfer -se molt fàcilment i tornar a resaltar la placa com necessiteu sense residus. Tot i això, els taps tenen un parell d’inconvenients clau.

En primer lloc, haureu de comprar la tapa específica compatible, cosa que els fa no versàtils. Haureu d’assegurar -vos que la tapa que escolliu s’adapta a la placa, que depèn del seu fabricant i que triïn o plana en funció del termociclista que utilitzeu.

En segon lloc, l’aplicació dels taps a la placa pot ser molt repetitiu i tediós, amb el risc de contaminació creuada si poseu el punt equivocat al bé.

Si bé els segells de pel·lícula són menys flexibles pel que fa a eliminar i substituir, són molt versàtils, ja que s’adaptaran a qualsevol tipus de placa PCR, sense tenir en compte qui és el fabricant. Simplement es poden tallar a la mida, fent -los molt efectius.

Una altra opció és una tapa de placa. Aquests ofereixen menys protecció que els taps i els segells, i només s’utilitzen per a cobertes a curt termini per evitar la contaminació.

Segells de pel·lícula òptica vs.

Si necessiteu un segell òptic, clar o unpel·lícula d'aluminiPer segellar la placa es decideix pel vostre format experimental.Pel·lícules de segellat òpticsón transparents per permetre -vos observar mostres, tot protegint -les i prevenir l’evaporació. També són especialment útils en experiments amb qPCR que consisteixen a fer mesures altament precises de fluorescència directament des de la placa, en aquest cas necessitareu una pel·lícula de segellat que filtri la menor fluorescència possible. És important assegurar -se que el segell o la tapa que utilitzeu tingui un nivell prou alt de claredat òptica per assegurar que les lectures siguin exactes.

Les pel·lícules de paper són adequades per a les mostres sensibles a la llum o que es guarden a menys de 80 ° C. Per aquest motiu, la majoria de mostres destinades a l’emmagatzematge a llarg termini requeriran una pel·lícula de paper. Les pel·lícules de fulls també es poden penetrar, cosa que és útil per examinar pous individuals o per a la transferència de mostres per agulles. Es pot produir manualment o com a part d’una plataforma robòtica.

Considereu també que les substàncies agressives que incloguin àcids, bases o dissolvents requereixen un segell que els pugui suportar, en aquest cas és probable que un segell de paper és més adequat.

Film Adhesive vs. Heat Sealing Film
Segells de cinema adhesiussón molt senzills i fàcils d’aplicar. Tot el que necessiteu és que un usuari apliqui el segell a la placa i utilitzeu una eina aplicable senzilla per pressionar i formar un segell ajustat.

Els segells de calor són més avançats, proporcionant un segell més durador que ha reduït les taxes d’evaporació en comparació amb un segell adhesiu convencional. Aquesta opció és adequada si voleu emmagatzemar mostres a llarg termini, tot i que això inclou un requisit addicional per a equips de segellat de plaques.

Com segellar una placa PCR

Mètode de segellat de plaques

Autoadhesiu

1. Assegureu -vos que esteu treballant en una superfície de treball pla i estable

2. Traieu la pel·lícula del seu envàs i traieu el suport

3. Col·loqueu amb cura el segell a la placa, alhora que assegureu -vos que tots els pous estiguin coberts

4. Utilitzeu una eina aplicada per aplicar pressió a la placa. Comenceu d’un extrem i aneu a l’altre, pressionant uniformement

5. Repetiu això en nombroses vegades

6. Executeu el vostre aplicador pels pous exteriors, per assegurar -vos que també estiguin segellats correctament.

Segells de calor

Els segells de calor funcionen fonent la pel·lícula a la vora de cada pou, amb l’ajuda d’un segellador de plaques. Per operar un segellador de calor, consulteu les instruccions proporcionades pel fabricant de l'equip. Assegureu -vos que el fabricant del qual proveu el vostre equip sigui de bona reputació, ja que és molt important que el segell sigui adequat, eficaç i està estancat.

Consells superiors de segellat de plaques

a. Quan apliqueu pressió al segell, aneu en direccions horitzontals i verticals per assegurar un segell adequat

b. Sempre és una bona pràctica executar una prova de tot el que feu, i això no és diferent amb el segellat de plaques. Prova amb una placa buida abans d’utilitzar -ne una amb mostres.

c. Quan proveu, traieu el segell i mireu que l’adhesiu s’enganxi correctament, sense buits. Hi ha una representació visual del primer document de referència. Si no heu segellat la placa correctament, quan traieu el segell, hi haurà buits on l’adhesiu no ha fet un enllaç completament a la placa.

d. Per a l'enviament i el transport de mostres, és possible que sigui útil aplicar un segell de plàstic a la part superior del segell de paper per a una protecció addicional (sobretot des de la perforació).

e. Assegureu -vos sempre que no hi hagi cops ni arrugues a l’hora d’aplicar la pel·lícula: això provocarà fuites i evaporació