Kako zapečatiti PCR ploču

Uvod

PCR ploče, glavna komponenta laboratorija dugi niz godina, postaju još rasprostranjeniji u modernom okruženju kako laboratorije povećavaju svoju propusnost i sve više koriste automatizaciju u svojim tokovima rada. Postizanje ovih ciljeva uz očuvanje tačnosti i integriteta eksperimenata može biti teško. Jedno od uobičajenih područja u koje se mogu uvući greške je zaptivanjePCR ploče, sa lošom tehnikom koja omogućava isparavanje uzoraka, mijenja pH i stoga ometa enzimske funkcije i izaziva kontaminaciju. Učenje kako zapečatiti aPCR pločaispravno eliminira ove rizike i osigurava ponovljive rezultate.

Pronađite pravi pečat za vašu PCR ploču

Pločasti poklopci naspram filmskih brtvi naspram poklopca
Capssu dobar način da čvrsto zapečatite svoju ploču, a istovremeno vam daju fleksibilnost da vrlo lako otpečate i ponovo zatvorite ploču po potrebi bez ikakvog otpada. Međutim, kape imaju nekoliko ključnih nedostataka.

Prvo, morat ćete kupiti određenu kapicu koja je kompatibilna, što ih čini nesvestranim. Morat ćete se pobrinuti da kapa koju odaberete odgovara pločici, koja ovisi o proizvođaču, i odabrati kupolastu ili ravnu na osnovu termociklera koji koristite.

Drugo, postavljanje čepova na ploču može biti vrlo ponavljajuće i zamorno, uz rizik od unakrsne kontaminacije ako stavite pogrešnu kapicu na pogrešan bunar.

Iako su filmske brtve manje fleksibilne u smislu uklanjanja i zamjene, vrlo su raznovrsne jer će odgovarati bilo kojoj vrsti PCR ploča, bez obzira na to tko je proizvođač. Mogu se jednostavno rezati na veličinu, što ih čini vrlo efektnim.

Druga opcija je poklopac tanjira. Oni nude manju zaštitu od čepova i brtvi i uglavnom se koriste samo za kratkotrajno pokrivanje kako bi se spriječila kontaminacija.

Optičke u odnosu na folije od folije

Bilo da vam je potreban optički, prozirni pečat ilifolija od aluminijumske folijeda zapečati vaš tanjir odlučuje vaš eksperimentalni format.Optičke zaptivne folijesu prozirne kako bi vam omogućile da promatrate uzorke, a istovremeno ih štite i sprječavaju isparavanje. Oni su također posebno korisni u qPCR eksperimentima koji uključuju visoko precizna mjerenja fluorescencije direktno sa ploče, u kom slučaju će vam trebati zaptivni film koji filtrira što je manje moguće fluorescencije. Važno je osigurati da brtva ili kapa koju koristite ima dovoljno visok nivo optičke jasnoće kako biste bili sigurni da su očitavanja tačna.

Folije od folije su prikladne za sve uzorke koji su osjetljivi na svjetlost ili se moraju čuvati na temperaturi ispod 80°C. Iz tog razloga, većina uzoraka namijenjenih za dugotrajno skladištenje zahtijeva foliju. Folije od folije također se mogu probiti, što je korisno ili za ispitivanje pojedinačnih bunara ili za prijenos uzoraka iglama. To se može dogoditi ručno ili kao dio robotske platforme.

Također uzmite u obzir da će agresivne tvari koje uključuju kiseline, baze ili rastvarače zahtijevati brtvu koja ih može izdržati, a u tom slučaju je vjerovatno prikladnije zaptivanje od folije.

Ljepilo naspram filma za toplinsko brtvljenje
Zaptivke ljepljivog filmavrlo su jednostavni i laki za primjenu. Sve što vam je potrebno je da korisnik nanese brtvu na ploču i pomoću jednostavnog aplikatora pritisne i formira čvrstu brtvu.

Toplotne zaptivke su naprednije i pružaju dugotrajnije zaptivanje koje ima smanjenu stopu isparavanja u poređenju sa konvencionalnim ljepljivim zaptivačima. Ova opcija je prikladna ako želite da pohranite uzorke na duži rok, iako to dolazi sa dodatnim zahtjevom za opremu za zaptivanje ploča.

Kako zapečatiti PCR ploču

Metoda zaptivanja ploča

Samoljepljiva

1. Uvjerite se da radite na ravnoj i stabilnoj radnoj površini

2. Izvadite foliju iz ambalaže i uklonite podlogu

3. Pažljivo stavite pečat na ploču, pazeći da su sve jažice pokrivene

4. Koristite aplikator da izvršite pritisak na ploču. Počnite s jednog kraja i prelazite na drugi, ravnomjerno pritiskajući

5. Ponovite ovo više puta

6. Prođite aplikatorom oko vanjskih udubljenja kako biste bili sigurni da su i oni dobro zapečaćeni.

Heat Seals

Toplotni zaptivači rade tako što se film otapa na rubu svake jažice, uz pomoć zaptivača za ploče. Da biste koristili toplotni zaptivač, pogledajte uputstva proizvođača opreme. Uvjerite se da je proizvođač od kojeg nabavite svoju opremu renomiran, jer je vrlo važno da je brtva ispravna, efikasna i vodonepropusna.

Vrhovi za zaptivanje ploča

a. Kada vršite pritisak na brtvu, idite u horizontalnom i okomitom smjeru kako biste osigurali pravilno brtvljenje

b. Uvijek je dobra praksa pokrenuti probni rad onoga što radite, a ovo se ne razlikuje ni sa zaptivanje ploča. Testirajte sa praznom pločom pre nego što upotrebite jednu sa uzorcima.

c. Prilikom testiranja skinite brtvu i pogledajte da li se ljepilo dobro zalijepilo, bez praznina. Postoji vizuelni prikaz ovoga u prvom referentnom dokumentu. Ako ploču niste pravilno zapečatili, kada uklonite zaptivku, pojavit će se praznine gdje se ljepilo nije u potpunosti vezalo za ploču.

d. Za slanje i transport uzoraka, možda će vam biti od pomoći staviti plastičnu brtvu na vrh folije za dodatnu zaštitu (posebno od probijanja).

e. Uvijek vodite računa da prilikom nanošenja filma nema neravnina ili bora – to će uzrokovati curenje i isparavanje