5 jednostavnih savjeta za sprječavanje grešaka pri radu s PCR pločama

Lančane reakcije polimeraze (PCR) jedna su od nadaleko poznatih metoda koje se koriste u laboratorijama prirodnih nauka.

PCR ploče se proizvode od prvoklasne plastike za odličnu obradu i analizu uzoraka ili prikupljenih rezultata.

Imaju tanke i homogene stijenke za precizan prijenos topline.

U pripremi za primjenu u realnom vremenu, minutni dijelovi DNK ili RNK se izdvajaju i pohranjuju u PCR ploče.

PCR ploče su veoma efikasne u toplotnom zavarivanju i takođe ograničavaju protok toplote.

Međutim, koliko su PCR ploče efikasne i pouzdane, greške i nepreciznosti se lako povlače tokom obrade uzoraka.

Stoga, ako ste zainteresovani da dobijete dobar i kvalitetanPCR ploče.Idealno je kontaktirati pouzdanog proizvođača PCR ploča. Sa ovim ste sigurni da ćete dobiti najbolju ponudu.

Evo nekoliko mjera opreza koje treba slijediti kako biste izbjegli kontaminaciju reagensa ili uzoraka i spriječili da se netočnosti uvuku u rezultate.

Sterilizacija okoline
Netačni pozitivni ili negativni rezultati se javljaju zbog prisustva nečistoća, zbog čega sumnjate u rezultate.

Nečistoće i zagađivači se javljaju u različitim oblicima kao što su nepovezani DNK ili hemijski aditivi koji na kraju smanjuju efikasnost i efektivnost reakcije.

Postoje brojni načini za značajno smanjenje stope kontaminacije PCR ploče.

Korištenje steriliziranih vrhova filtera je još jedan koristan način da spriječite da nečistoće uđu u vaše uzorke kroz pipete.

Posvetite potpuno čist set opreme, koji se sastoji od pipeta i stalaka, isključivo za upotrebu PCR. Ovo će garantovati zanemarljiv prijenos nečistoća ili zagađivača oko laboratorija.

Koristite izbjeljivače, etanol na pipetama, policama i klupama da obrišete zagađivače.

Dodijelite rezervirani prostor za sve vaše PCR reakcije kako biste dalje minimizirali kontaminaciju česticama.

Koristite čiste rukavice na svakom koraku i često ih mijenjajte.

PCR ploče
Provjerite koncentraciju i čistoću predloška.
Treba održavati čistoću stola i opreme koja se koristi za analizu uzoraka pomoću PCR-a. Bitno je potvrditi stepen čistoće uzoraka prije analize i obrade.

Generalno, analizatori uzimaju u obzir koncentraciju i nivo čistoće DNK uzoraka.

Nastojte da odnos apsorbancije za 260nm/280nm ne sme biti manji od 1,8. Dok se naknadne talasne dužine između 230nm i 320nm koriste za identifikaciju nečistoća.

Na primjer, haotropne soli i druga organska jedinjenja detektuju se pri brzini apsorpcije od 230 nm. Dok se zamućenost u DNK uzorcima takođe detektuje i verifikuje pri stopi apsorpcije od 320 nm.

Izbjegavajte preopterećenje PCR ploča s proizvodom
Koliko god se željelo pokrenuti više proizvoda istovremeno, to rezultira unakrsnom kontaminacijom PCR ploča.

Preopterećenje PCR ploča različitim proizvodima otpada i čini izuzetno teškim utvrđivanje uzoraka.

Vodite evidenciju o alikvotnim PCR reagensima
Kontinuirani ciklusi zamrzavanja/odmrzavanja i česta upotreba alikvota mogu oštetiti PCR reagense, enzime i DNTP kroz rekristalizaciju.

Uvijek nastojte pratiti količinu alikvota koji se koristi dok pripremate uzorke za analizu.

Poželjni LIMS je prikladniji za kontrolu inventara i količine zamrznutih ili odmrznutih reagensa i uzoraka.

Odaberite najbolju temperaturu žarenja.
Odabir i korištenje pogrešne temperature žarenja je još jedan metod koji PCR rezultati sadrže grešku.

Ponekad reakcija ne ide po planu. Poželjno je smanjiti temperaturu žarenja kako bi se olakšala uspješna reakcija.

Međutim, snižavanje temperature povećava šanse za lažno pozitivne rezultate i pojavu dimera prajmera.

Značajno je potvrditi analizu krivulje topljenja kada se koriste PCR ploče jer je to dobar pokazatelj odabira ispravne temperature žarenja.

Softver za dizajn prajmera pomaže u projektovanju, obezbeđivanje prave temperature žarenja uz direktno smanjenje greške u PCR pločama.

Potrebna vam je visokokvalitetna PCR ploča?
U slučaju da ste razmišljali gdje pronaći pouzdanog proizvođačaPCR ploče. Ne tražite više jer ste na pravom mjestu.

Ljubaznokliknite ovdje da nas kontaktirateza visokokvalitetne proizvode i usluge po cijeni koja neće slomiti banku.


Vrijeme objave: 30.10.2021