সফল পরিবর্ধন প্রতিক্রিয়াগুলির জন্য, প্রতিটি প্রস্তুতিতে পৃথক প্রতিক্রিয়ার উপাদানগুলি সঠিক ঘনত্বে উপস্থিত থাকা প্রয়োজন। উপরন্তু, এটা গুরুত্বপূর্ণ যে কোন দূষণ ঘটে না।
বিশেষ করে যখন অনেক প্রতিক্রিয়া সেট-আপ করতে হয়, তখন প্রতিটি পাত্রে প্রতিটি বিকারককে আলাদাভাবে পাইপ করার পরিবর্তে একটি তথাকথিত মাস্টার মিশ্রণ প্রস্তুত করার জন্য এটি প্রতিষ্ঠিত হয়েছে। পূর্ব-কনফিগার করা মিশ্রণগুলি বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ, যেখানে শুধুমাত্র নমুনা-নির্দিষ্ট উপাদান (প্রাইমার) এবং জল যোগ করা হয়। বিকল্পভাবে, মাস্টার মিশ্রণ নিজের দ্বারা প্রস্তুত করা যেতে পারে। উভয় ভেরিয়েন্টে, মিশ্রণটি একটি টেমপ্লেট ছাড়াই প্রতিটি পিসিআর জাহাজে বিতরণ করা হয় এবং পৃথক ডিএনএ নমুনা শেষে আলাদাভাবে যোগ করা হয়।
একটি মাস্টার মিশ্রণ ব্যবহার করে বেশ কয়েকটি সুবিধা রয়েছে: প্রথমত, একক পাইপটিং ধাপের সংখ্যা হ্রাস করা হয়। এইভাবে, পাইপিংয়ের সময় ব্যবহারকারীর ত্রুটির ঝুঁকি এবং দূষণের ঝুঁকি উভয়ই হ্রাস করা হয় এবং অবশ্যই সময় বাঁচানো হয়। নীতিগতভাবে, পাইপিংয়ের নির্ভুলতাও বেশি, যেহেতু বড় ভলিউম ডোজ করা হয়। পাইপেটের প্রযুক্তিগত ডেটা পরীক্ষা করার সময় এটি বোঝা সহজ: ডোজ ভলিউম যত ছোট হবে, বিচ্যুতি তত বেশি হতে পারে। সত্য যে সমস্ত প্রস্তুতি একই পাত্র থেকে আসে তা একজাতীয়তার উপর ইতিবাচক প্রভাব ফেলে (যদি ভালভাবে মিশ্রিত হয়)। এটি পরীক্ষাগুলির প্রজননযোগ্যতাও উন্নত করে।
মাস্টার মিশ্রণ প্রস্তুত করার সময়, কমপক্ষে 10% অতিরিক্ত ভলিউম যোগ করা উচিত (যেমন যদি 10টি প্রস্তুতির প্রয়োজন হয়, 11 এর ভিত্তিতে গণনা করুন), যাতে শেষ পাত্রটিও সঠিকভাবে ভরা হয়। এইভাবে, (সামান্য) পাইপটিং ত্রুটি, এবং ডিটারজেন্ট-ধারণকারী সমাধান ডোজ করার সময় নমুনা ক্ষতির প্রভাব ক্ষতিপূরণ করা যেতে পারে। ডিটারজেন্টগুলি এনজাইম দ্রবণে থাকে যেমন পলিমারেজ এবং মাস্টার মিক্স, যা স্বাভাবিকের ভিতরের পৃষ্ঠে ফেনা তৈরি করে এবং অবশিষ্টাংশ সৃষ্টি করে।পাইপেট টিপস.
প্রয়োগ এবং তরলের প্রকারের উপর নির্ভর করে, সঠিক পাইপটিং কৌশল (1) নির্বাচন করা উচিত এবং উপযুক্ত সরঞ্জাম নির্বাচন করা উচিত। ডিটারজেন্টযুক্ত সমাধানগুলির জন্য, একটি সরাসরি স্থানচ্যুতি ব্যবস্থা বা বায়ু-কুশন পাইপেটের বিকল্প হিসাবে তথাকথিত "নিম্ন ধারণ" পাইপেট টিপস সুপারিশ করা হয়। এর প্রভাবACE PIPETTE টিপবিশেষ করে হাইড্রোফোবিক পৃষ্ঠের উপর ভিত্তি করে। ডিটারজেন্ট ধারণকারী তরল ভিতরে এবং বাইরে একটি অবশিষ্ট ফিল্ম ছেড়ে না, যাতে দ্রবণ ক্ষতি হ্রাস করা যেতে পারে।
সমস্ত উপাদানের সঠিক ডোজ ছাড়াও, এটিও গুরুত্বপূর্ণ যে প্রস্তুতিগুলির কোনও দূষণ ঘটে না। উচ্চ বিশুদ্ধতার ভোগ্যপণ্য ব্যবহার করা যথেষ্ট নয়, কারণ বায়ু কুশন পাইপেটে পাইপেটিং প্রক্রিয়ার ফলে পাইপেটে থাকা অ্যারোসল তৈরি হতে পারে। অ্যারোসলের মধ্যে থাকা ডিএনএ নিম্নলিখিত পাইপটিং ধাপে এক নমুনা থেকে অন্য নমুনায় স্থানান্তরিত হতে পারে এবং এইভাবে দূষণের দিকে পরিচালিত করে। উপরে উল্লিখিত সরাসরি স্থানচ্যুতি ব্যবস্থাগুলিও এই ঝুঁকি কমাতে পারে। এয়ার-কুশন পাইপেটের জন্য স্প্ল্যাশ, অ্যারোসল এবং জৈব অণুগুলি ধরে রেখে পিপেট শঙ্কু রক্ষা করার জন্য ফিল্টার টিপস ব্যবহার করা বোধগম্য।
পোস্টের সময়: ডিসেম্বর-০৬-২০২২