প্রক্রিয়াগুলির মানীকরণের মধ্যে তাদের অপ্টিমাইজেশন এবং পরবর্তী প্রতিষ্ঠা এবং সুরেলাকরণ অন্তর্ভুক্ত রয়েছে, যা দীর্ঘমেয়াদী অনুকূল কর্মক্ষমতা-ব্যবহারকারীর থেকে পৃথক। মানককরণ উচ্চ-মানের ফলাফল, পাশাপাশি তাদের পুনরুত্পাদনযোগ্যতা এবং তুলনামূলকতা নিশ্চিত করে।
(ক্লাসিক) পিসিআর এর লক্ষ্য একটি নির্ভরযোগ্য এবং পুনরুত্পাদনযোগ্য ফলাফলের প্রজন্ম। নির্দিষ্ট অ্যাপ্লিকেশনগুলির জন্য, ফলনপিসিআর পণ্যএছাড়াও প্রাসঙ্গিক। এই প্রতিক্রিয়াগুলির জন্য, নমুনাগুলি আপোস না করা এবং পিসিআর কর্মপ্রবাহ স্থিতিশীল থাকে তা নিশ্চিত করার জন্য যত্ন নিতে হবে। বিশেষত, এটি দূষণের প্রবর্তনকে হ্রাস করতে অনুবাদ করে যা মিথ্যা ইতিবাচক বা মিথ্যা নেতিবাচক ফলাফলের দিকে নিয়ে যেতে পারে বা এমনকি পিসিআর প্রতিক্রিয়াটিকে বাধা দিতে পারে। তদ্ব্যতীত, প্রতিক্রিয়া শর্তগুলি একটি রানের মধ্যে প্রতিটি পৃথক নমুনার জন্য যথাসম্ভব অভিন্ন হওয়া উচিত এবং পরবর্তী প্রতিক্রিয়াগুলিতে (একই পদ্ধতির) স্থানান্তরযোগ্য হওয়া উচিত। এটি প্রতিক্রিয়াগুলির সংমিশ্রণের পাশাপাশি সাইক্লারে তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণের ধরণকে বোঝায়। ব্যবহারকারীর ত্রুটিগুলি অবশ্যই যথাসম্ভব এড়ানো উচিত।
নীচে, আমরা প্রস্তুতির সময় এবং পিসিআর চালানোর সময় জুড়ে যে চ্যালেঞ্জগুলি মুখোমুখি হয়েছিল তা প্রদর্শন করব - এবং পিসিআর ওয়ার্কফ্লোগুলির মানককরণের জন্য ব্যবহৃত যন্ত্রপাতি এবং ভোক্তাগুলির ক্ষেত্রে বিদ্যমান সমাধানের পদ্ধতির।
প্রতিক্রিয়া প্রস্তুতি
পিসিআর-ভেসেল বা প্লেটগুলিতে যথাক্রমে প্রতিক্রিয়া উপাদানগুলি বিতরণ করা একাধিক চ্যালেঞ্জের সমন্বয়ে গঠিত যা অবশ্যই কাটিয়ে উঠতে হবে:
প্রতিক্রিয়া শর্ত
সর্বাধিক অভিন্ন প্রতিক্রিয়ার অবস্থার জন্য লক্ষ্য করার সময় পৃথক উপাদানগুলির সঠিক এবং সুনির্দিষ্ট ডোজটি অপরিহার্য। একটি ভাল পাইপটিং কৌশল ছাড়াও, সঠিক সরঞ্জামটি নির্বাচন করা গুরুত্বপূর্ণ। পিসিআর মাস্টার-মিক্সগুলিতে প্রায়শই এমন পদার্থ থাকে যা সান্দ্রতা বাড়ায় বা ফেনা উত্পন্ন করে। পাইপটিং প্রক্রিয়া চলাকালীন, এগুলি যথেষ্ট পরিমাণে ভিজে যায়পিপেট টিপস, এইভাবে পাইপটিং নির্ভুলতা হ্রাস। সরাসরি বিতরণ সিস্টেম বা বিকল্প পিপেট টিপসের ব্যবহার যা ভিজে যাওয়ার ঝুঁকিতে কম থাকে তা পাইপটিং প্রক্রিয়াটির যথার্থতা এবং যথার্থতা উন্নত করতে পারে।
দূষণ
বিতরণ প্রক্রিয়া চলাকালীন, অ্যারোসোলগুলি উত্পন্ন হয় যা যদি পাইপেটের অভ্যন্তরে পৌঁছানোর অনুমতি দেয় তবে পরবর্তী পাইপটিং পদক্ষেপের সময় সম্ভাব্যভাবে অন্য নমুনা দূষিত করতে পারে। ফিল্টার টিপস বা সরাসরি স্থানচ্যুতি সিস্টেম ব্যবহার করে এটি প্রতিরোধ করা যেতে পারে।
যেমন ভোক্তাটিপস, পিসিআর ওয়ার্কফ্লোতে ব্যবহৃত জাহাজ এবং প্লেটগুলিতে এমন পদার্থ থাকতে হবে না যা নমুনায় আপস করে বা ফলাফলকে মিথ্যা বলে। এর মধ্যে রয়েছে ডিএনএ, ডিএনএএসএস, আরএনএএসএস এবং পিসিআর ইনহিবিটারগুলি, পাশাপাশি এমন উপাদানগুলি যা প্রতিক্রিয়া চলাকালীন উপাদানগুলি থেকে সম্ভাব্যভাবে ফাঁস হতে পারে - লিচেবল হিসাবে পরিচিত পদার্থগুলি।
ব্যবহারকারী ত্রুটি
যত বেশি নমুনা প্রক্রিয়া করা হয়, ত্রুটির ঝুঁকি তত বেশি। এটি সহজেই ঘটতে পারে যে কোনও নমুনা ভুল পাত্র বা ভুল কূপের মধ্যে পাইপেট করা হয়। এই ঝুঁকিটি কূপগুলির সহজেই চিহ্নিতযোগ্য চিহ্নিতকরণ দ্বারা যথেষ্ট হ্রাস করা যেতে পারে। বিতরণ পদক্ষেপের অটোমেশনের মাধ্যমে, "মানব ফ্যাক্টর", আইই, ত্রুটিগুলি এবং ব্যবহারকারী সম্পর্কিত বিভিন্নতাগুলি হ্রাস করা হয়, এইভাবে পুনরুত্পাদনযোগ্যতা বৃদ্ধি করে, বিশেষত ছোট প্রতিক্রিয়া ভলিউমের ক্ষেত্রে। এর জন্য একটি ওয়ার্কস্টেশনে নিযুক্ত করার জন্য পর্যাপ্ত মাত্রিক স্থিতিশীলতার প্লেট প্রয়োজন। সংযুক্ত বারকোডগুলি অতিরিক্ত মেশিন-পঠনযোগ্যতা সরবরাহ করে, যা পুরো প্রক্রিয়া জুড়ে নমুনা ট্র্যাকিংকে সহজতর করে।
থার্মোসাইক্লারের প্রোগ্রামিং
প্রোগ্রামিং একটি উপকরণ সময় সাপেক্ষ পাশাপাশি ত্রুটি-প্রবণ হিসাবে প্রমাণিত হতে পারে। বিভিন্ন পিসিআর থার্মাল সাইক্লার বৈশিষ্ট্যগুলি এই প্রক্রিয়া পদক্ষেপটি সহজ করার জন্য এবং সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণভাবে এটি সুরক্ষিত করার জন্য একসাথে কাজ করে:
সহজ অপারেশন এবং ভাল ব্যবহারকারীর গাইডেন্স হ'ল দক্ষ প্রোগ্রামিংয়ের ভিত্তি। এই ফাউন্ডেশনে বিল্ডিং, পাসওয়ার্ড-সুরক্ষিত ব্যবহারকারী প্রশাসন অন্য ব্যবহারকারীদের দ্বারা নিজের প্রোগ্রামগুলি পরিবর্তন করা থেকে বিরত রাখবে। যদি একাধিক সাইক্লার (একই ধরণের) ব্যবহারে থাকে তবে কোনও প্রোগ্রাম যদি ইউএসবি বা সংযোগের মাধ্যমে সরাসরি একটি যন্ত্র থেকে অন্য যন্ত্রে স্থানান্তরিত করা যায় তবে এটি উপকারী। কম্পিউটার সফ্টওয়্যার একটি কম্পিউটারে প্রোগ্রাম, ব্যবহারকারীর অধিকার এবং নথিগুলির কেন্দ্রীয় এবং সুরক্ষিত প্রশাসনকে সক্ষম করে।
পিসিআর রান
রান চলাকালীন, ডিএনএ প্রতিক্রিয়া জাহাজে প্রশস্ত করা হয়, যেখানে প্রতিটি নমুনা অভিন্ন, ধারাবাহিক প্রতিক্রিয়া শর্তের শিকার হওয়া উচিত। নিম্নলিখিত দিকগুলি প্রক্রিয়াটির জন্য প্রাসঙ্গিক:
তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ
তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণে দুর্দান্ত নির্ভুলতা এবং সাইক্লার ব্লকের একজাতীয়তাও সমস্ত নমুনার তাপমাত্রা কন্ডিশনার জন্য ভিত্তি। হিটিং এবং কুলিং উপাদানগুলির উচ্চ মানের (পেল্টিয়ার উপাদানগুলি), পাশাপাশি এগুলি যেভাবে ব্লকের সাথে সংযুক্ত রয়েছে, তা হ'ল সিদ্ধান্ত গ্রহণকারী কারণগুলি যা "প্রান্ত প্রভাব" নামে পরিচিত তাপমাত্রার তাত্পর্যগুলির ঝুঁকি নির্ধারণ করবে
বাষ্পীভবন
পৃথক প্রতিক্রিয়া উপাদানগুলির ঘনত্ব বাষ্পীভবনের কারণে প্রতিক্রিয়া চলাকালীন পরিবর্তন করা উচিত নয়। অন্যথায়, এটি খুব সামান্য সম্ভবপিসিআর পণ্যউত্পন্ন হতে পারে, বা মোটেও কিছুই নয়। সুরক্ষিত সিল নিশ্চিত করে বাষ্পীভবন হ্রাস করা তাই গুরুত্বপূর্ণ। এই ক্ষেত্রে, থার্মোসাইক্লারের উত্তপ্ত id াকনা এবং পাত্রের সিলটি হাতে হাতে কাজ করে। বিভিন্ন সিলিং বিকল্পগুলির জন্য উপলব্ধপিসিআর প্লেট (লিঙ্ক: সিলিং নিবন্ধ), যার মাধ্যমে তাপ সিলিংয়ের মাধ্যমে সেরা সিলটি অর্জন করা হয়। অন্যান্য বন্ধগুলিও উপযুক্ত হতে পারে, যতক্ষণ না সাইক্লারের id াকনাটির যোগাযোগের চাপটি নির্বাচিত সিলের সাথে সামঞ্জস্য করা যায়।
দীর্ঘমেয়াদে সঠিক এবং পুনরুত্পাদনযোগ্য ফলাফলগুলি সুরক্ষার জন্য প্রক্রিয়া মানককরণ স্থানে রয়েছে। এটি সর্বদা ভাল কাজের অবস্থায় রয়েছে তা নিশ্চিত করার জন্য সরঞ্জামগুলির নিয়মিত রক্ষণাবেক্ষণ অন্তর্ভুক্ত। সমস্ত ভোক্তা উত্পাদিত সমস্ত প্রচুর জুড়ে ধারাবাহিকভাবে উচ্চ মানের হওয়া উচিত এবং তাদের নির্ভরযোগ্য প্রাপ্যতা অবশ্যই গ্যারান্টিযুক্ত হতে হবে।
পোস্ট সময়: নভেম্বর -29-2022