হ্যান্ডহেল্ড ম্যানুয়াল পাইপেট দিয়ে কীভাবে ছোট ভলিউম পিপেট করবেন

যেহেতু বিকারক এবং খরচ কমানোর উপর বেশি ফোকাস করা হচ্ছে, ছোট ভলিউমের চাহিদা বেশি, যেমন, পিসিআর মাস্টারমিক্স বা এনজাইম বিক্রিয়ার প্রস্তুতির জন্য। কিন্তু 0.2 - 5 μL থেকে ছোট ভলিউম পাইপিং করা সঠিকতা এবং নির্ভুলতার জন্য নতুন চ্যালেঞ্জ সেট করে। নিম্নলিখিত পয়েন্টগুলি অপরিহার্য:

1. পিপেট এবং টিপের আকার: সর্বদা সম্ভাব্য সর্বনিম্ন নামমাত্র ভলিউম সহ পাইপেট নির্বাচন করুন এবং বায়ু কুশন যতটা সম্ভব ছোট রাখার জন্য সবচেয়ে ছোট টিপ। 1 µL পাইপেটিং করার সময়, 1 - 10 µL পিপেটের পরিবর্তে একটি 0.25 – 2.5 μL পিপেট এবং ম্যাচিং টিপ বেছে নিন।
2. ক্রমাঙ্কন এবং রক্ষণাবেক্ষণ: আপনার পাইপেটগুলি সঠিকভাবে ক্যালিব্রেট করা এবং রক্ষণাবেক্ষণ করা অপরিহার্য। পিপেটের ছোট সামঞ্জস্য এবং ভাঙা অংশগুলি পদ্ধতিগত এবং এলোমেলো ত্রুটির মানগুলিতে ব্যাপক বৃদ্ধি ঘটায়। ISO 8655 অনুযায়ী একটি ক্রমাঙ্কন অবশ্যই বছরে একবার করতে হবে।
3. ইতিবাচক স্থানচ্যুতি পাইপেট: আপনার ল্যাবে কম ভলিউম পরিসীমা সহ একটি ইতিবাচক স্থানচ্যুতি পাইপেট আছে কিনা তা পরীক্ষা করুন। সাধারণভাবে, এই ধরনের পাইপেট ব্যবহার করে ক্লাসিক এয়ার-কুশন পাইপেটের তুলনায় নির্ভুলতা এবং নির্ভুলতার দিক থেকে একটি ভাল পাইপেটিং ফলাফল পাওয়া যায়।
4. বৃহত্তর ভলিউম ব্যবহার করার চেষ্টা করুন: আপনি চূড়ান্ত প্রতিক্রিয়ায় একই পরিমাণে বড় ভলিউম পিপেট করার জন্য আপনার নমুনাকে পাতলা করার কথা বিবেচনা করতে পারেন। এটি খুব ছোট নমুনা ভলিউম সহ পাইপটিং ত্রুটিগুলি কমাতে পারে।

একটি ভাল টুল ছাড়াও, গবেষকের একটি খুব ভাল পাইপটিং কৌশল থাকতে হবে। নিম্নলিখিত পদক্ষেপগুলিতে বিশেষ মনোযোগ দিন:

1. টিপ সংযুক্তি: পিপেটকে ডগায় জ্যাম করবেন না কারণ এটি সূক্ষ্ম টিপের প্রান্তের ক্ষতি করতে পারে যার ফলে তরল রশ্মি পুনঃনির্দেশিত হতে পারে বা ছিদ্রের ক্ষতি হতে পারে। একটি টিপ সংযুক্ত করার সময় শুধুমাত্র হালকা চাপ প্রয়োগ করুন এবং একটি স্প্রিং-লোডেড টিপ শঙ্কু সহ একটি পাইপেট ব্যবহার করুন।
2. পিপেট ধরে রাখা: সেন্ট্রিফিউজ, সাইক্লার ইত্যাদির জন্য অপেক্ষা করার সময় আপনার হাতে পিপেট ধরবেন না। পাইপেটের ভেতরের অংশ গরম হয়ে যাবে এবং বায়ু কুশনকে প্রসারিত করবে যার ফলে পাইপেট করার সময় সেট ভলিউম থেকে বিচ্যুতি ঘটবে।
3. প্রাক-ভেজা: ডগা এবং পিপেটের ভিতরে বাতাসের আর্দ্রতা নমুনার জন্য ডগা প্রস্তুত করে এবং স্থানান্তর ভলিউমকে উচ্চাকাঙ্ক্ষী করার সময় বাষ্পীভবন এড়ায়।
4. উল্লম্ব আকাঙ্খা: যখন পাইপেট একটি কোণে রাখা হয় তখন কৈশিক প্রভাব এড়াতে ছোট আয়তন পরিচালনা করার সময় এটি খুবই গুরুত্বপূর্ণ।
5. নিমজ্জন গভীরতা: কৈশিক প্রভাবের কারণে ডগায় তরল প্রবেশ রোধ করতে ডগাটিকে যতটা সম্ভব কম ডুবিয়ে দিন। অঙ্গুষ্ঠের নিয়ম: টিপ এবং আয়তন যত ছোট হবে, নিমজ্জনের গভীরতা তত কম হবে। ছোট ভলিউম পাইপিং করার সময় আমরা সর্বাধিক 2 মিমি সুপারিশ করি।
6. 45° কোণে বিতরণ করা: পিপেটটি 45° কোণে রাখা হলে তরলটির সর্বোত্তম প্রবাহ নিশ্চিত করা হয়।
7. জাহাজের প্রাচীর বা তরল পৃষ্ঠের সাথে যোগাযোগ: ছোট ভলিউমগুলি কেবল তখনই সঠিকভাবে বিতরণ করা যেতে পারে যখন জাহাজের প্রাচীরের সাথে ডগা রাখা হয়, বা তরলে নিমজ্জিত হয়। এমনকি টিপ থেকে শেষ ড্রপ সঠিকভাবে বিতরণ করা যেতে পারে.
8. ব্লো-আউট: ডগায় উপস্থিত তরলটির শেষ ফোঁটাও বিতরণ করার জন্য কম পরিমাণে বিতরণ করার পরে একটি ব্লো-আউট বাধ্যতামূলক। ব্লো-আউটটি জাহাজের প্রাচীরের বিরুদ্ধেও করা উচিত। তরল পৃষ্ঠে ব্লো-আউট করার সময় নমুনায় বায়ু বুদবুদ না আনার বিষয়ে সতর্ক থাকুন।