Микропипетата е може би най-използваният инструмент в лабораторията. Те се използват от учени в широк спектър от сектори, включително академични среди, болници и съдебни лаборатории, както и разработване на лекарства и ваксини за прехвърляне на точни, много малки количества течност
Въпреки че може да бъде досадно и разочароващо да забележите въздушни мехурчета в накрайника на пипетата за еднократна употреба, ако не са забелязани или пренебрегнати, това може да окаже огромно влияние върху надеждността и възпроизводимостта на резултатите.
Добрата новина е, че има някои прости мерки, които можете да предприемете, за да предотвратите въздушни мехурчета и да подобрите ефективността на лабораторията, удовлетворението на оператора, както и точността и прецизността на резултатите.
По-долу разглеждаме последствията от получаването на въздушно мехурче във върха на пипетата и какво трябва да направите след това.
Последиците от мехурчетата вНакрайник за пипета
Дори ако използвате най-точните, първокласни, добре поддържани, обслужвани и калибрирани пипети, надеждността на вашите резултати може да бъде повлияна от лабораторни грешки. Когато мехурчетата попаднат всъветможе да има няколко резултата.
● Когато потребителят забележи въздушното мехурче, той трябва да отдели време за правилното дозиране на аспирираната течност, да извади накрайника и да започне процеса отново.
● Неоткритите въздушни мехурчета могат да доведат до пренос на малък обем, като по този начин променят концентрацията на реакционните смеси, което води до неуспешни експерименти и съмнителни или ненадеждни резултати.
Тези резултати могат да имат няколко последствия (1).
● Намалена ефективност на лабораторията – Тестовете и анализите ще трябва да се повтарят, което води до разходи за труд и материали, които могат да бъдат доста значителни.
● Съмнителни или неправилни резултати от теста – Ако бъдат публикувани неправилни резултати, може да има по-сериозни последици, включително грешна диагноза и лоши резултати за пациентите.
● Оттегляне на ръкописи от списания – Ако връстниците не успеят да повторят вашите резултати поради въздушни мехурчета, причиняващи неточни резултати, документите могат да бъдат оттеглени.
Най-добри практики за предотвратяване на въздушни мехурчета
В повечето случаи въздушните мехурчета в накрайниците на пипетите са причинени от грешка на оператора. Лошата техника поради недостатъчно обучение или умора обикновено е основният проблем.
Пипетирането е квалифицирана операция, която изисква 110% внимание, подходящо обучение и практика за постигане на постоянни и точни резултати.
Въпреки че има няколко неща, които можете да направите, за да намалите общите грешки при пипетиране, по-долу сме подчертали някои най-добри практики, които могат да се използват, за да избегнете въздушни мехурчета внакрайници за пипети.
Подобрете техниката на потребителя
Пипетирайте бавно
Ако буталото се освободи твърде бързо при аспириране, в накрайника могат да се вкарат въздушни мехурчета. Това може да бъде особено проблематично при прехвърляне на вискозни течности. Подобен ефект може да възникне, ако буталото се освободи твърде бързо след дозиране.
За да избегнете въздушни мехурчета при аспириране, внимавайте да управлявате буталото на ръчните пипети по плавен и правилен начин, като прилагате постоянна сила.
Използвайте правилната дълбочина на потапяне
Неуспешното потапяне на върха на пипетата достатъчно дълбоко под менискуса на резервоара за течност може да доведе до аспирация на въздух и по този начин до образуване на мехурчета.
Въпреки това, потапянето на върха твърде дълбоко може да аспирира повече течност поради повишено налягане или могат да се появят капчици от външната страна на върха, така че е важно да потопитевърха на пипетатадо правилната дълбочина.
Препоръчителната дълбочина варира в зависимост от размера, вида и марката на пипетата. Въпреки че трябва да се следват препоръките на производителя, ето общо ръководство, предоставено от Националната физическа лаборатория.
Ръководство за дълбочината на потапяне на върха
Обем на пипетата (µl) и дълбочина на потапяне (mm)
- 1 – 100: 2 – 3
- 100 – 1000: 2 – 4
- 1000 – 5000: 2 – 5
Предварително намокрянеНакрайници за пипети
При пипетиране на обеми, по-големи от 10µlнакрайници за пипетиобикновено се намокрят предварително, като се пълнят няколко пъти с изливаната течност и се изхвърлят на отпадъци, за да се подобри точността.
Ако не ги намокрите предварително, това може да доведе до въздушни мехурчета, особено когато се използват вискозни или хидрофобни течности. За да избегнете въздушни мехурчета, намокрете предварително накрайниците, когато пипетирате обем, по-голям от 10 µl.
Използвайте техники за обратно пипетиране, ако е подходящо
Вискозни вещества: Често срещан проблем при пипетиране на вискозни вещества като разтвори на протеини или нуклеинови киселини, глицерол и Tween 20/40/60/80 е честото образуване на мехурчета, когато се използва техниката за пипетиране напред.
Бавното пипетиране, като се използва техниката на обратно пипетиране, намалява риска от образуване на мехурчета при прехвърляне на вискозни разтвори.
Техника ELISA
Обратното пипетиране също се препоръчва при пипетиране на малки обеми вПлаки за микротест с 96 ямкиза ELISA техники. Когато въздушните мехурчета се изтеглят в пипетата или се разпределят в ямки при добавяне на реагенти, това може да повлияе на стойностите на оптичната плътност и резултатите. Препоръчва се обратно пипетиране, за да се минимизира или елиминира този проблем.
Използвайте ергономични пипети
Старите пипети, които не са проектирани с мисъл за ергономията, изискват повече физическо усилие, вие се уморявате и техниката ви на пипетиране става небрежна и лоша. Грешките, споменати по-горе, като бързо освобождаване на буталото, могат да се появят по-често.
Като инвестирате в по-ергономично решение, ще можете да поддържате отлична техника и да предотвратите образуването на въздушни мехурчета поради лоша техника.
Отделете време за обучение на персонала
Редовното обучение и оценяване на персонала в техниките на пипетиране може да гарантира, че грешките на оператора и образуването на въздушни мехурчета са намалени.
Помислете за повече автоматизирани решения
Както беше отбелязано по-горе, повечето въздушни мехурчета се причиняват от оператора. Може да е възможно да се намалят грешките на оператора и комфортът чрез използване на електронни пипети или гъвкава платформа за обработка на течности катоРобот за обработка на течности Agilent Bravo.
Използвайте добро качествоНакрайници за пипети
Микропипетите обикновено се купуват внимателно, но често малко се обръща внимание на качеството на еднократния накрайник на пипетата. Поради влиянието, което накрайникът оказва върху резултатите от пипетирането, стандартът ISO 8655 изисква допълнително калибриране, ако се използват пипети и накрайници от различни производители.
Това може да се дължи на факта, че много евтини накрайници може да изглеждат добре първоначално, но когато ги проучите внимателно, те може да имат проблясъци, изпъкналости, драскотини и въздушни мехурчета или да са огънати или да съдържат примеси.
Купуването на висококачествени накрайници от висококачествен полипропилен може да намали появата на въздушни мехурчета.
За заключение
Попадането на въздушни мехурчета във върха на пипетата оказва влияние върху ефективността на лабораторията, както и върху неточността и неточността на резултатите. Отбелязахме няколко неща, които можете да направите, за да избегнете навлизането на въздушни мехурчета ввърха на пипетата.
Въпреки това, ако е лошо качествонакрайници за пипетипричиняват навлизане на въздушни мехурчета във върха на пипетата ви, ще се радвате да научите, че нашата универсална годностнакрайници за пипетиса направени по най-високите стандарти и са изработени от първокласен чист полипропилен.
Биомедицинска компания Suzhou Aceпроизвеждат висококачествени универсални накрайници за пипети с обеми 10,20,50,100,200,300,1000 и 1250 µL, 96 накрайника/стойка. Изключителна издръжливост – всички поставки за накрайници ACE отговарят на изискванията за употреба с многоканални пипети. Стерилен, филтър, без РНКаза/ДНКаза и непирогенен.
Заповядайте да ни попитате за повече подробности.
Време на публикуване: 29 декември 2022 г