Як запячатаць пласціну для ПЦР

Уводзіны

ПЦР пласціны, які быў адным з асноўных элементаў лабараторыі на працягу многіх гадоў, становіцца яшчэ больш распаўсюджаным у сучасных умовах, паколькі лабараторыі павялічваюць сваю прапускную здольнасць і ўсё часцей выкарыстоўваюць аўтаматызацыю ў сваіх працоўных працэсах. Дасягненне гэтых мэтаў пры захаванні дакладнасці і цэласнасці эксперыментаў можа быць складаным. Адзін з распаўсюджаных момантаў, дзе могуць узнікнуць памылкі, - гэта герметызацыяПЦР пласціны, з дрэннай тэхнікай, якая дазваляе выпарыць пробы, змяняючы pH і, такім чынам, парушаючы ферментатыўныя функцыі і выклікаючы забруджванне. Навучыцца запячатваць аПласціна ПЦРправільна ліквідуе гэтыя рызыкі і забяспечвае ўзнаўляльныя вынікі.

Знайдзіце правільную пломбу для вашай пласціны ПЦР

Пласцінныя каўпачкі супраць плёнкавых ушчыльненняў супраць вечкаў
Шапкіз'яўляюцца добрым спосабам герметычна запячатаць вашу талерку, але пры гэтым вы можаце вельмі лёгка адкрываць і зноў запячатваць пласціну, як вам трэба, без якіх-небудзь адходаў. Тым не менш, шапкі маюць некалькі асноўных недахопаў.

Па-першае, вам трэба будзе набыць канкрэтную шапку, якая сумяшчальная, што робіць іх неўніверсальнымі. Вы павінны пераканацца, што абраны вамі каўпачок падыходзіць да пласціны, што залежыць ад яе вытворцы, і выбраць купалападобны або плоскі ў залежнасці ад тэрмацыклера, які вы выкарыстоўваеце.

Па-другое, нанясенне каўпачкоў на пласціну можа быць вельмі шматразовым і стомным, з рызыкай перакрыжаванага заражэння, калі вы надзенеце не той каўпачок на няправільную лунку.

У той час як пломбы плёнкі менш гнуткія з пункту гледжання выдалення і замены, яны вельмі ўніверсальныя, паколькі падыходзяць да любога тыпу пласцін ПЦР, незалежна ад таго, хто з'яўляецца вытворцам. Іх можна проста выразаць па памеры, што робіць іх вельмі эфектнымі.

Яшчэ адзін варыянт - талерка-вечка. Яны забяспечваюць меншую абарону, чым каўпачкі і пломбы, і ў асноўным выкарыстоўваюцца толькі для кароткатэрміновага прыкрыцця для прадухілення заражэння.

Аптычнае ўшчыльненне супраць фальгі

Незалежна ад таго, патрэбна вам аптычная, празрыстая пячатка абоплёнка з алюмініевай фальгізапячатаць вашу талерку вырашае ваш эксперыментальны фармат.Плёнкі для аптычнай герметызацыіз'яўляюцца празрыстымі, што дазваляе назіраць за ўзорамі, у той жа час абараняючы іх і прадухіляючы выпарэнне. Яны таксама асабліва карысныя ў эксперыментах qPCR, якія прадугледжваюць правядзенне высокадакладных вымярэнняў флуарэсцэнцыі непасрэдна з пласціны. У гэтым выпадку вам спатрэбіцца герметызавальная плёнка, якая адфільтроўвае як мага менш флуарэсцэнцыі. Важна пераканацца, што пломба або каўпачок, якія вы выкарыстоўваеце, маюць дастаткова высокі ўзровень аптычнай празрыстасці, каб паказанні былі дакладнымі.

Плёнкі з фальгі падыходзяць для любых узораў, якія адчувальныя да святла або якія павінны захоўвацца пры тэмпературы ніжэй за 80°C. Па гэтай прычыне для большасці ўзораў, прызначаных для працяглага захоўвання, спатрэбіцца плёнка з фальгі. Плёнкі з фальгі таксама праколваюцца, што карысна альбо для даследавання асобных лунак, альбо для пераносу узораў іголкамі. Гэта можа адбывацца ўручную або як частка рабатызаванай платформы.

Таксама ўлічыце, што агрэсіўныя рэчывы, якія ўключаюць кіслоты, асновы або растваральнікі, патрабуюць ушчыльнення, якое можа супрацьстаяць ім, і ў гэтым выпадку ўшчыльненне з фальгі, верагодна, будзе больш прыдатным.

Клей супраць термосваривающей плёнкі
Пломбы клейкай плёнкайвельмі зразумелыя і лёгка ўжываюцца. Усё, што вам трэба, гэта каб карыстальнік прыклаў пломбу да пласціны і выкарыстаў просты інструмент-аплікатар, каб націснуць і сфармаваць шчыльнае ўшчыльненне.

Цеплавыя ўшчыльняльнікі з'яўляюцца больш прасунутымі, забяспечваючы больш працяглы ўшчыльненне, якое зніжае хуткасць выпарэння ў параўнанні са звычайным клейкім ушчыльненнем. Гэты варыянт падыходзіць, калі вы збіраецеся захоўваць узоры ў доўгатэрміновай перспектыве, хоць гэта прадугледжвае дадатковыя патрабаванні да абсталявання для запячатвання пласцін.

Як запячатаць пласціну для ПЦР

Метад пласціны

Самаклейная

1. Пераканайцеся, што вы працуеце на роўнай і ўстойлівай працоўнай паверхні

2. Дастаньце плёнку з упакоўкі і зніміце падкладку

3. Акуратна пастаўце пломбу на пласціну, пераканаўшыся, што ўсе лункі зачыненыя

4. Выкарыстоўвайце інструмент-аплікатар, каб націснуць на пласціну. Пачніце з аднаго канца і рухайцеся да іншага, раўнамерна націскаючы

5. Паўтарыце гэта некалькі разоў

6. Правядзіце аплікатарам па вонкавых лунках, каб пераканацца, што яны таксама належным чынам зачынены.

Цеплавыя ўшчыльняльнікі

Цеплавая герметызацыя працуе шляхам плаўлення плёнкі да вобада кожнай лункі з дапамогай герметызатара пласцін. Каб працаваць з термосваркой, звярніцеся да інструкцый, прадстаўленых вытворцам абсталявання. Пераканайцеся, што вытворца, ад якога вы набываеце абсталяванне, мае аўтарытэт, бо вельмі важна, каб ушчыльненне было правільным, эфектыўным і воданепранікальным.

Лепшыя парады па ўшчыльненні пліт

а. Аказваючы ціск на ўшчыльненне, рухайцеся ў гарызантальным і вертыкальным напрамках, каб забяспечыць належнае ўшчыльненне

б. Гэта заўсёды добрая практыка - запусціць тэставы запуск таго, што вы робіце, і гэта не адрозніваецца з герметызацыяй пласціны. Перад выкарыстаннем талеркі з узорамі праверце пустую талерку.

в. Пры праверцы зніміце пломбу і пераканайцеся, што клей належным чынам прыліп, без зазораў. Візуальнае адлюстраванне гэтага ёсць у першым даведачным дакуменце. Калі вы не запячаталі пласціну належным чынам, калі вы выдаліце ​​пломбу, застануцца шчыліны, дзе клей не цалкам счапіўся з пласцінай.

d. Для дастаўкі і транспарціроўкі ўзораў вам можа быць карысна наклеіць пластыкавую пломбу на пломбу з фальгі для дадатковай абароны (асабліва ад праколаў).

д. Заўсёды сочыце за тым, каб пры нанясенні плёнкі не было няроўнасцяў і зморшчын - гэта прывядзе да ўцечак і выпарэння