Калі аб'ёмы піпеткі ад 0,2 да 5 мкл, дакладнасць і дакладнасць піпеткі мае надзвычай важнае значэнне, добрая тэхніка піпеткі мае важнае значэнне, паколькі памылкі звароту больш відавочныя з невялікімі аб'ёмамі.
Па меры таго, як больш увагі надаецца зніжэнню рэагентаў і выдаткаў, меншыя аб'ёмы карыстаюцца вялікім попытам, напрыклад, для падрыхтоўкі ПЦР Mastermix або рэакцый ферментаў. Але Піпетынг невялікіх аб'ёмаў ад 0,2 - 5 мкл усталёўвае новыя праблемы для дакладнасці і дакладнасці піпетаў. Наступныя моманты важныя:
- Памер піпеткі і наканечніка: Заўсёды выбірайце піпетку з самым нізкім намінальным аб'ёмам і самым маленькім наканечнікам, каб захаваць паветраную падушку як мага менш. Пры піпеце 1 мкл, напрыклад, выберыце піпетку 0,25 - 2,5 мкл і адпаведную наканечнік, а не 1 - 10 мкл піпеткі.
- Каліброўка і абслугоўванне: Важна, каб вашы піпеткі былі правільна адкалібраваны і захаваны. Невялікія карэкціроўкі і разбітыя дэталі на піпеце прыводзяць да масавага павелічэння сістэмных і выпадковых значэнняў памылак. Каліброўка ў адпаведнасці з ISO 8655 павінна ажыццяўляцца раз у год.
- Піпеткі станоўчых перамяшчэнняў: праверце, ці ёсць у вашай лабараторыі станоўчы піпетка для зрушэння з нізкім дыяпазонам аб'ёму. Увогуле, выкарыстанне такога тыпу піпеткі прыводзіць да лепшага вынікаў піпеткі з пункту гледжання дакладнасці і дакладнасці, чым з класічнымі піпеткамі з паветранай касцюма.
- Паспрабуйце выкарыстоўваць вялікія аб'ёмы: вы можаце разгледзець пытанне аб развядзенні ўзору да вялікіх аб'ёмаў піпеткі з аднолькавай колькасцю ў канчатковай рэакцыі. Гэта можа паменшыць памылкі піпеткі з вельмі невялікімі аб'ёмамі ўзору.
У дадатак да добрага інструмента, даследчык павінен мець вельмі добрую тэхніку піпеткі. Звярніце асаблівую ўвагу на наступныя крокі:
- Укладанне наканечніка: Не замяняйце піпетку на кончык, бо гэта можа пашкодзіць тонкі канец наканечніка, што прывядзе да перанакіравання вадкага прамяня або пашкодзіць адтуліну. Атрымайце лёгкі ціск толькі пры мацаванні наканечніка і выкарыстоўвайце піпетку з конусам наканечніка.
- Утрымліваючы піпетку: Не трымайце піпетку ў руцэ, чакаючы цэнтрабежнай, цыклера і г.д. Унутраная частка піпеткі награваецца і прывядзе падушкі паветра, каб пашырыцца, што прыводзіць да адхіленняў ад усталяванага аб'ёму пры піпецінгу.
- Папярэдняе ўтрыманне: Увільгатненне паветра ўнутры кончыка і піпеткі рыхтуе наканечнік для ўзору і пазбягае выпарэння пры аспіраванні аб'ёму перадачы.
- Вертыкальнае імкненне: Гэта вельмі важна пры апрацоўцы невялікіх аб'ёмаў, каб пазбегнуць капілярнага эфекту, які ўзнікае, калі піпета трымаецца пад вуглом.
- Глыбіня апускання: пагрузіце наканечнік як мага менш, каб прадухіліць увядзенне вадкасці з -за капілярнага эфекту. Правіла вялікага пальца: чым меншы наканечнік і аб'ём, тым ніжэй глыбіня апускання. Мы рэкамендуем максімум 2 мм, калі піпэтуе невялікія аб'ёмы.
- Дадатак пад вуглом 45 °: аптымальны паток вадкасці гарантавана, калі піпетка ўтрымліваецца пад вуглом 45 °.
- Кантакт з сценкай сасудаў або вадкай паверхняй: невялікія аб'ёмы можна правільна адпусціць толькі тады, калі наканечнік утрымліваецца да сценкі судна альбо пагружаны ў вадкасць. Нават апошнюю кроплю з наканечніка можна адпусціць дакладна.
- Удар: Удар з'яўляецца абавязковым пасля аднаўлення нізкіх аб'ёмаў, каб адпусціць нават апошнюю кроплю вадкасці, якая прысутнічае ў кончыку. Удар таксама павінен ажыццяўляцца да сцяны судна. Будзьце асцярожныя, каб не прыносіць паветраныя бурбалкі ў пробу пры выкананні выдування на паверхні вадкасці.
Час паведамлення: 18 лютага 2011 г.