Што такое крыяпрабіркі?
Крыягенныя флаконы для захоўванняКрыяпрабіркі — гэта невялікія цыліндрычныя кантэйнеры з вечкамі, прызначаныя для захоўвання і захавання ўзораў пры звышнізкіх тэмпературах. Нягледзячы на тое, што традыцыйна гэтыя флаконы вырабляліся са шкла, цяпер яны значна часцей вырабляюцца з поліпрапілену з меркаванняў зручнасці і кошту. Крыяпрабіркі былі старанна распрацаваны, каб вытрымліваць тэмпературы да -196℃ і змяшчаць шырокі спектр тыпаў клетак. Яны вар'іруюцца ад дыягнастычных ствалавых клетак, мікраарганізмаў, першасных клетак да ўсталяваных клеткавых ліній. Акрамя таго, унутры могуць захоўвацца таксама дробныя шматклеткавыя арганізмы.крыягенныя флаконы для захоўвання, а таксама нуклеінавыя кіслоты і бялкі, якія неабходна захоўваць пры крыягенных тэмпературах.
Крыягенныя флаконы для захоўвання бываюць розных формаў, і выбар патрэбнага тыпу, які адпавядае ўсім вашым патрэбам, гарантуе захаванне цэласнасці ўзору без пераплаты. Прачытайце наш артыкул, каб даведацца больш пра ключавыя меркаванні пры выбары падыходнага крыяпрабіркі для вашай лабараторнай працы.
Уласцівасці крыягеннай ампулы, якія варта ўлічваць
Знешняя і ўнутраная разьба
Людзі часта робяць гэты выбар, зыходзячы з асабістых пераваг, але на самой справе існуюць ключавыя функцыянальныя адрозненні паміж гэтымі двума тыпамі разьбы, якія варта ўлічваць.
Многія лабараторыі часта выбіраюць флаконы з унутранай разьбой, каб мінімізаваць месца для захоўвання прабірак і лепш іх змясціць у маразільныя камеры. Нягледзячы на гэта, вы можаце лічыць, што варыянт з вонкавай разьбой — лепшы варыянт для вас. Лічыцца, што яны маюць меншы рызыка забруджвання з-за канструкцыі, якая яшчэ больш абцяжарвае трапленне ў флакон чаго-небудзь, акрамя ўзору.
Для геномных ужыванняў звычайна пераважней выкарыстоўваць флаконы з вонкавай разьбой, але любы з варыянтаў лічыцца прыдатным для біябанкаў і іншых высокапрадукцыйных ужыванняў.
І апошняе, што трэба ўлічваць пры наразанні разьбы: калі ў вашай лабараторыі выкарыстоўваецца аўтаматызацыя, вам, магчыма, спатрэбіцца падумаць, якую разьбу можна выкарыстоўваць з заціскальнікамі інструментаў.
Аб'ём сховішча
Крыягенныя флаконы выпускаюцца ў розных памерах, каб задаволіць большасць патрэб, але ў асноўным яны маюць ёмістасць ад 1 мл да 5 мл.
Галоўнае — пераканацца, што крыяпрабірка не перапоўнена і што ёсць дадатковае месца на выпадак, калі ўзор набракне падчас замарожвання. На практыцы гэта азначае, што лабараторыі выбіраюць флаконы аб'ёмам 1 мл пры захоўванні ўзораў аб'ёмам 0,5 мл клетак, суспендаваных у крыяпратэктары, і флаконы аб'ёмам 2,0 мл для захоўвання 1,0 мл узору. Яшчэ адна парада, як не перапаўняць флаконы, — выкарыстоўваць крыяпрабіркі з градуяванай разметкай, што дапаможа прадухіліць набраканне, якое можа прывесці да расколін або ўцечкі.
Закручваемая вечка супраць адкідной вечка
Тып вечка, які вы абярэце, залежыць галоўным чынам ад таго, ці будзеце вы выкарыстоўваць вадкафазны азот. Калі так, то вам спатрэбяцца крыяпрабіркі з закручвальнымі вечкамі. Гэта гарантуе, што яны не адкрыюцца выпадкова з-за няправільнага абыходжання або перападаў тэмпературы. Акрамя таго, закручвальныя вечкі дазваляюць лягчэй даставаць з крыягенных скрынь і больш эфектыўна захоўваць.
Аднак, калі вы не выкарыстоўваеце вадкі азот і вам патрэбна больш зручная вечка, якую лягчэй адкрываць, то адкідная вечка — лепшы варыянт. Гэта зэканоміць вам шмат часу, бо яе значна лягчэй адкрываць, што робіць яе асабліва карыснай у аперацыях з высокай прапускной здольнасцю і тых, дзе выкарыстоўваюцца пакетныя працэсы.
Бяспека пячатак
Найлепшы спосаб забяспечыць надзейную герметызацыю — пераканацца, што вечка і бутэлька крыяпрабіркі выраблены з аднаго матэрыялу. Гэта забяспечыць іх адначасовае сцісканне і пашырэнне. Калі яны выраблены з розных матэрыялаў, то пры змене тэмпературы яны будуць сціскацца і пашырацца з рознай хуткасцю, што прывядзе да з'яўлення шчылін і магчымай уцечкі, а значыць, і да забруджвання.
Некаторыя кампаніі прапануюць падвойныя шайбы і фланец для найвышэйшага ўзроўню бяспекі ўзораў на крыяпрабірках з вонкавай разьбой. Крыяпрабіркі з O-Ring лічацца найбольш надзейнымі для крыяпрабірак з унутранай разьбой.
Шкло супраць пластыка
Дзеля бяспекі і зручнасці многія лабараторыі цяпер выкарыстоўваюць пластык, звычайна поліпрапілен, замест тэрмагерметычных шкляных ампул. Шкляныя ампулы зараз лічацца састарэлым выбарам, бо падчас працэсу герметызацыі могуць утварыцца нябачныя адтуліны, якія пры размарожванні пасля захоўвання ў вадкім азоце могуць прывесці да іх выбуху. Яны таксама не так добра падыходзяць для сучасных метадаў маркіроўкі, што з'яўляецца ключом да забеспячэння адсочвання ўзораў.
Самастойныя супраць закругленых дна
Крыягенныя флаконы даступныя як асобнастаячыя з зоркападобным дном, так і з круглявым дном. Калі вам трэба размясціць флаконы на паверхні, абавязкова выберыце асобнастаячы варыянт.
Адсочванне і адсочванне ўзораў
Гэтая вобласць крыягеннага захоўвання часта ігнаруецца, але адсочванне і прасочванне ўзораў з'яўляецца найважнейшым аспектам, які трэба ўлічваць. Крыягенныя ўзоры могуць захоўвацца на працягу многіх гадоў, на працягу якіх персанал можа мяняцца, і без належнага вядзення запісаў яны могуць стаць неідэнтыфікаванымі.
Абавязкова выбірайце флаконы, якія максімальна спрашчаюць ідэнтыфікацыю ўзораў. Варта звярнуць увагу на наступнае:
Вялікія палі для запісу дастатковай колькасці звестак, каб запісы можна было знайсці, калі флакон знаходзіцца ў няправільным месцы — звычайна дастаткова ідэнтыфікацыі клеткі, даты замарозкі і ініцыялаў адказнай асобы.
Штрых-коды для палягчэння кіравання ўзорамі і сістэм адсочвання
Каляровыя кепкі
Заўвага на будучыню — распрацоўваюцца ультрамарозаўстойлівыя чыпы, якія, калі іх змясціць у асобныя крыяпрабіркі, патэнцыйна могуць захоўваць падрабязную тэрмічную гісторыю, а таксама падрабязную інфармацыю аб партыі, вынікі выпрабаванняў і іншую адпаведную дакументацыю аб якасці.
Акрамя ўліку розных спецыфікацый даступных флаконаў, неабходна таксама падумаць пра тэхнічны працэс захоўвання крыяпрабірак у вадкім азоце.
Тэмпература захоўвання
Існуе некалькі метадаў крыягеннага захоўвання ўзораў, кожны з якіх працуе пры пэўнай тэмпературы. Варыянты і тэмпература, пры якіх яны працуюць, ўключаюць:
Вадкая фаза LN2: падтрымліваць тэмпературу -196℃
Газафазны LN2: здольны працаваць пры пэўных тэмпературных дыяпазонах ад -135°C да -190°C у залежнасці ад мадэлі.
Азотныя маразільнікі: ад -20°C да -150°C
Тып клетак, якія захоўваюцца, і пераважны даследчыкам метад захоўвання вызначаць, які з трох даступных варыянтаў выкарыстоўвае ваша лабараторыя.
Аднак з-за надзвычай нізкіх тэмператур, якія выкарыстоўваюцца, не ўсе прабіркі або канструкцыі будуць прыдатнымі або бяспечнымі. Матэрыялы могуць стаць надзвычай далікатнымі пры надзвычай нізкіх тэмпературах, выкарыстанне флакона, непрыдатнага для выкарыстання пры абранай тэмпературы, можа прывесці да разбурэння або расколіны сасуда падчас захоўвання або размарозкі.
Уважліва праверце рэкамендацыі вытворцаў па правільным выкарыстанні, бо некаторыя крыягенныя флаконы падыходзяць для тэмператур да -175°C, некаторыя -150°C, іншыя - толькі 80°C.
Варта таксама адзначыць, што многія вытворцы заяўляюць, што іх крыягенныя флаконы не падыходзяць для апускання ў вадкую фазу. Калі гэтыя флаконы захоўваюцца ў вадкай фазе, пры вяртанні да пакаёвай тэмпературы гэтыя флаконы або іх вечкі могуць разарвацца з-за хуткага назапашвання ціску, выкліканага невялікімі ўцечкамі.
Калі клеткі будуць захоўвацца ў вадкай фазе вадкага азоту, варта захоўваць клеткі ў адпаведных крыягенных флаконах, запячатаных у крыяфлексных трубках, або ў шкляных ампулах, якія герметычна зачыненыя.
Час публікацыі: 25 лістапада 2022 г.