5 простых парад па прадухіленні памылак пры працы з пласцінамі для ПЦР

Палімеразная ланцуговая рэакцыя (ПЦР) з'яўляецца адным з шырока вядомых метадаў, якія выкарыстоўваюцца ў біялагічных лабараторыях.

ПЦР-пласціны вырабляюцца з першакласных пластмас для выдатнай апрацоўкі і аналізу проб або сабраных вынікаў.

Яны маюць тонкія аднастайныя сценкі, якія забяспечваюць дакладную цеплаперадачу.

У рамках падрыхтоўкі да прымянення ў рэжыме рэальнага часу дробныя ўчасткі ДНК або РНК адасабляюцца і захоўваюцца ў пласцінах для ПЦР.

ПЦР-пласціны вельмі эфектыўныя ў тэрмічнай зварцы, а таксама абмяжоўваюць паток цяпла.

Аднак, наколькі эфектыўнымі і надзейнымі з'яўляюцца ПЦР-пласціны, памылкі і недакладнасці лёгка ўхіляюцца пры апрацоўцы ўзораў.

Таму, калі вы зацікаўлены ў атрыманні добрага і якаснагаПЦР пласціны.Ідэальна звярнуцца да надзейнага вытворцы пласцін для ПЦР. З гэтым вы можаце быць упэўнены, што атрымаеце лепшую здзелку.

Вось некаторыя меры засцярогі, якіх трэба прытрымлівацца, каб пазбегнуць забруджвання рэагентаў або ўзораў і прадухіліць недакладнасці ў выніку.

Стэрылізацыя наваколля
Няправільныя станоўчыя або адмоўныя вынікі ўзнікаюць з-за наяўнасці прымешак, што прымушае сумнявацца ў выніках.

Прымешкі і забруджванні сустракаюцца ў розных формах, такіх як нероднасная ДНК або хімічныя дабаўкі, якія ў канчатковым выніку зніжаюць эфектыўнасць і выніковасць рэакцыі.

Ёсць мноства спосабаў значна знізіць хуткасць забруджвання пласціны ПЦР.

Выкарыстанне стэрылізаваных наканечнікаў фільтраў - яшчэ адзін карысны спосаб прадухіліць пранікненне прымешак у вашы ўзоры праз піпеткі.

Прысвяціце цалкам чысты набор абсталявання, які складаецца з піпетак і стэлажоў, выключна для выкарыстання ПЦР. Гэта гарантуе нязначны перанос прымешак або забруджванняў па лабараторыі.

Выкарыстоўвайце адбельвальнікі, этанол на піпетках, стэлажах і лаўках, каб выцерці забруджванні.

Вылучыце зарэзерваванае месца для ўсіх вашых рэакцый ПЦР, каб мінімізаваць заражэнне часціцамі.

Выкарыстоўвайце чыстыя пальчаткі на кожным кроку і часта мяняйце іх.

ПЦР пласціны
Праверце канцэнтрацыю і чысціню шаблону.
Варта падтрымліваць чысціню стэнда і абсталявання, якое выкарыстоўваецца пры аналізе проб з дапамогай ПЦР. Перад аналізам і апрацоўкай вельмі важна праверыць ступень чысціні проб.

Як правіла, аналізатары ўлічваюць канцэнтрацыю і ўзровень чысціні узораў ДНК.

Старайцеся, каб стаўленне паглынання для 260 нм/280 нм не павінна быць меншым за 1,8. У той час як наступныя даўжыні хвалі ад 230 нм да 320 нм выкарыстоўваюцца для ідэнтыфікацыі прымешак.

У асобніку хаатропныя солі і іншыя арганічныя злучэнні выяўляюцца пры хуткасці паглынання 230 нм. У той час як мутнасць у пробах ДНК таксама выяўляецца і правяраецца пры хуткасці паглынання 320 нм.

Пазбягайце перагрузкі пласцін ПЦР прадуктам
Нягледзячы на ​​​​тое, што хочацца выкарыстоўваць некалькі прадуктаў адначасова, гэта прыводзіць да перакрыжаванага забруджвання ПЦР-пласцін.

Перагрузка ПЦР-пласцін рознымі адходамі прадуктаў вельмі ўскладняе праверку ўзораў.

Вядзіце запісы аліквотных ПЦР-рэагентаў
Бесперапынныя цыклы замарожвання/адтавання і частае выкарыстанне аліквот могуць пашкодзіць ПЦР-рэагенты, ферменты і DNTP праз перакрышталізацыю.

Заўсёды старайцеся кантраляваць норму аліквоты, якая выкарыстоўваецца пры падрыхтоўцы проб для аналізу.

Пераважны LIMS больш падыходзіць для кантролю запасаў і колькасці замарожаных або размарожаных рэагентаў і ўзораў.

Выберыце лепшую тэмпературу адпалу.
Выбар і выкарыстанне няправільнай тэмпературы адпалу - яшчэ адзін метад, у якім вынікі ПЦР утрымліваюць памылку.

Часам рэакцыя ідзе не так, як планавалася. Пажадана знізіць тэмпературу адпалу, каб спрыяць паспяховай рэакцыі.

Аднак паніжэнне тэмпературы павялічвае верагоднасць ілжывых спрацоўванняў і з'яўлення дымераў грунтоўкі.

Вельмі важна пацвердзіць аналіз крывой плаўлення пры выкарыстанні пласцін ПЦР, паколькі гэта добры паказчык выбару правільнай тэмпературы адпалу.

Праграмнае забеспячэнне для распрацоўкі праймераў дапамагае ў распрацоўцы, забяспечваючы правільную тэмпературу адпалу з прамым памяншэннем памылак у пласцінах ПЦР.

Патрэбна якасная пласціна для ПЦР?
У выпадку, калі вы думалі, дзе знайсці надзейнага вытворцыПЦР пласціны. Больш не шукайце, бо вы знаходзіцеся ў патрэбным месцы.

ласкаванацісніце тут, каб звязацца з наміза высокую якасць прадуктаў і паслуг па цане, якая не сапсуе банк.


Час публікацыі: 30 кастрычніка 2021 г