Палімеразная ланцуговая рэакцыя (ПЦР) з'яўляецца адным з шырока вядомых метадаў, якія выкарыстоўваюцца ў біялагічных лабараторыях.
ПЦР-пласціны вырабляюцца з першакласных пластмас для выдатнай апрацоўкі і аналізу проб або сабраных вынікаў.
Яны маюць тонкія аднастайныя сценкі, якія забяспечваюць дакладную цеплаперадачу.
У рамках падрыхтоўкі да прымянення ў рэжыме рэальнага часу дробныя ўчасткі ДНК або РНК адасабляюцца і захоўваюцца ў пласцінах для ПЦР.
ПЦР-пласціны вельмі эфектыўныя ў тэрмічнай зварцы, а таксама абмяжоўваюць паток цяпла.
Аднак, наколькі эфектыўнымі і надзейнымі з'яўляюцца ПЦР-пласціны, памылкі і недакладнасці лёгка ўхіляюцца пры апрацоўцы ўзораў.
Таму, калі вы зацікаўлены ў атрыманні добрага і якаснагаПЦР пласціны.Ідэальна звярнуцца да надзейнага вытворцы пласцін для ПЦР. З гэтым вы можаце быць упэўнены, што атрымаеце лепшую здзелку.
Вось некаторыя меры засцярогі, якіх трэба прытрымлівацца, каб пазбегнуць забруджвання рэагентаў або ўзораў і прадухіліць недакладнасці ў выніку.
Стэрылізацыя наваколля
Няправільныя станоўчыя або адмоўныя вынікі ўзнікаюць з-за наяўнасці прымешак, што прымушае сумнявацца ў выніках.
Прымешкі і забруджванні сустракаюцца ў розных формах, такіх як нероднасная ДНК або хімічныя дабаўкі, якія ў канчатковым выніку зніжаюць эфектыўнасць і выніковасць рэакцыі.
Ёсць мноства спосабаў значна знізіць хуткасць забруджвання пласціны ПЦР.
Выкарыстанне стэрылізаваных наканечнікаў фільтраў - яшчэ адзін карысны спосаб прадухіліць пранікненне прымешак у вашы ўзоры праз піпеткі.
Прысвяціце цалкам чысты набор абсталявання, які складаецца з піпетак і стэлажоў, выключна для выкарыстання ПЦР. Гэта гарантуе нязначны перанос прымешак або забруджванняў па лабараторыі.
Выкарыстоўвайце адбельвальнікі, этанол на піпетках, стэлажах і лаўках, каб выцерці забруджванні.
Вылучыце зарэзерваванае месца для ўсіх вашых рэакцый ПЦР, каб мінімізаваць заражэнне часціцамі.
Выкарыстоўвайце чыстыя пальчаткі на кожным кроку і часта мяняйце іх.
ПЦР пласціны
Праверце канцэнтрацыю і чысціню шаблону.
Варта падтрымліваць чысціню стэнда і абсталявання, якое выкарыстоўваецца пры аналізе проб з дапамогай ПЦР. Перад аналізам і апрацоўкай вельмі важна праверыць ступень чысціні проб.
Як правіла, аналізатары ўлічваюць канцэнтрацыю і ўзровень чысціні узораў ДНК.
Старайцеся, каб стаўленне паглынання для 260 нм/280 нм не павінна быць меншым за 1,8. У той час як наступныя даўжыні хвалі ад 230 нм да 320 нм выкарыстоўваюцца для ідэнтыфікацыі прымешак.
У асобніку хаатропныя солі і іншыя арганічныя злучэнні выяўляюцца пры хуткасці паглынання 230 нм. У той час як мутнасць у пробах ДНК таксама выяўляецца і правяраецца пры хуткасці паглынання 320 нм.
Пазбягайце перагрузкі пласцін ПЦР прадуктам
Нягледзячы на тое, што хочацца выкарыстоўваць некалькі прадуктаў адначасова, гэта прыводзіць да перакрыжаванага забруджвання ПЦР-пласцін.
Перагрузка ПЦР-пласцін рознымі адходамі прадуктаў вельмі ўскладняе праверку ўзораў.
Вядзіце запісы аліквотных ПЦР-рэагентаў
Бесперапынныя цыклы замарожвання/адтавання і частае выкарыстанне аліквот могуць пашкодзіць ПЦР-рэагенты, ферменты і DNTP праз перакрышталізацыю.
Заўсёды старайцеся кантраляваць норму аліквоты, якая выкарыстоўваецца пры падрыхтоўцы проб для аналізу.
Пераважны LIMS больш падыходзіць для кантролю запасаў і колькасці замарожаных або размарожаных рэагентаў і ўзораў.
Выберыце лепшую тэмпературу адпалу.
Выбар і выкарыстанне няправільнай тэмпературы адпалу - яшчэ адзін метад, у якім вынікі ПЦР утрымліваюць памылку.
Часам рэакцыя ідзе не так, як планавалася. Пажадана знізіць тэмпературу адпалу, каб спрыяць паспяховай рэакцыі.
Аднак паніжэнне тэмпературы павялічвае верагоднасць ілжывых спрацоўванняў і з'яўлення дымераў грунтоўкі.
Вельмі важна пацвердзіць аналіз крывой плаўлення пры выкарыстанні пласцін ПЦР, паколькі гэта добры паказчык выбару правільнай тэмпературы адпалу.
Праграмнае забеспячэнне для распрацоўкі праймераў дапамагае пры распрацоўцы, забяспечваючы правільную тэмпературу адпалу з прамым памяншэннем памылак у пласцінах ПЦР.
Патрэбна высакаякасная пласціна для ПЦР?
У выпадку, калі вы думалі, дзе знайсці надзейнага вытворцыПЦР пласціны. Больш не шукайце, бо вы знаходзіцеся ў правільным месцы.
ласкаванацісніце тут, каб звязацца з наміза высокую якасць прадуктаў і паслуг па цане, якая не сапсуе банк.
Час публікацыі: 30 кастрычніка 2021 г