Uğurlu gücləndirmə reaksiyaları üçün, fərdi reaksiya komponentlərinin hər bir hazırlıqdakı düzgün konsentrasiyada olması lazımdır. Bundan əlavə, heç bir çirklənmənin baş verməməsi vacibdir.
Xüsusilə bir çox reaksiyaların qurulması lazım olduqda, hər bir bazaya ayrıca hər bir reagentin dəyişdirilməsi əvəzinə qondarma usta qarışığı hazırlamaq üçün qurulmuşdur. Əvvəlcədən konfiqurasiya edilmiş qarışıqlar yalnız nümunə xüsusi komponentlər (astar) və suyun əlavə olunduğu ticari olaraq mövcuddur. Alternativ olaraq, usta qarışığı özünüz hazırlaya bilər. Hər iki variantda qarışıq hər PCR gəmisinə şablon olmadan paylanır və fərdi DNT nümunəsi sonunda ayrıca əlavə olunur.
Bir usta qarışığından istifadə bir neçə üstünlükə malikdir: birincisi, tək boru kəməri addımlarının sayı azalır. Bu şəkildə, həm də boru kəməri zamanı istifadəçi səhvləri riski və çirklənmə riski minimuma endirilir və əlbəttə ki, vaxt qeyd olunur. Prinsipcə, daha böyük həcmlər dozalanandan bəri, boru kəməri dəqiqliyi də daha yüksəkdir. Pipetlərin texniki məlumatlarını yoxlayarkən başa düşmək asandır: daha kiçik həcm, sapmalar nə qədər yüksəkdir. Bütün hazırlıqların eyni gəmidən gəlməsi, homojenliyə (yaxşı qarışdırılırsa) müsbət təsir göstərir. Bu da təcrübələrin reproduklessini də yaxşılaşdırır.
Master qarışığını hazırlayarkən ən azı 10% əlavə həcm əlavə olunmalıdır (məsələn, 10 hazırlıq tələb olunursa, 11), hətta son gəmi düzgün doldurulsun. Bu şəkildə, (yüngül) boşalmalar, yuyucu vasitənin tərkibli həlləri dozası olduqda nümunə itkisinin təsiri kompensasiya edilə bilər. Yeterjilər, polimeraslar və master qarışığı kimi ferment həllərində, köpük meydana gəlməsinə və daxili səthində qalıqların içərisinə səbəb olurPipette haqqında göstərişlər.
Tətbiqdən və maye növündən asılı olaraq, Düzgün Boru kəməri Texnikası (1) seçilməli və seçilmiş avadanlıq seçilməlidir. Yuyucu vasitələr olan həllər üçün birbaşa yerdəyişmə sistemi və ya "aşağı tutma" pipet tövsiyələri, hava yastığı pipetləri üçün alternativ olaraq tövsiyə olunur. TəsiriAce pipet ucuxüsusilə hidrofobik bir səthə əsaslanır. Yuyucu maddələr olan mayelər içəridə və xaricdə bir qalıcı bir film buraxmırlar ki, həll itkisi minimuma endirilə bilər.
Bütün komponentlərin dəqiq dozası ilə yanaşı, hazırlıqların heç bir çirklənməsinin olmaması da vacibdir. Yüksək saflıqdan istehlak materiallarından istifadə etmək kifayət deyil, çünki hava yastığı pipetində boru kəməri pipetində boru kəmərində olan aerozollar istehsal edə bilər. Aerozolda olan DNT, bir nümunədən digərinə ötürülə bilər və beləliklə çirklənməyə səbəb ola bilər. Yuxarıda göstərilən birbaşa yerdəyişmə sistemləri də bu riski minimuma endirə bilər. Hava yastığı pipetləri üçün sıçrayışlar, aerozollar və biomolekullar saxlamaqla, pipet konusunu qorumaq üçün filtr tövsiyələrindən istifadə etmək mənası var.
Saat: Dekabr-06-2022