Proseslərin standartlaşdırılması onların optimallaşdırılması və sonrakı yaradılması və uyğunlaşma və uyğunlaşma, uzunmüddətli optimal performansa imkan verir - istifadəçinin müstəqildir. Standartlaşdırma yüksək keyfiyyətli nəticələr, eləcə də onların reprodukless və müqayisəsi təmin edir.
(Klassik) PCR-in məqsədi etibarlı və reproduksiya nəticəsində yaranan nəsildir. Müəyyən tətbiqlər üçün məhsuldarlıqPCR məhsuludə aktualdır. Bu reaksiyalar üçün nümunələrin güzəştə getməsinin və PCR iş axını sabit qalmasını təmin etmək üçün diqqət yetirilməlidir. Xüsusilə, bu, saxta müsbət və ya yalan mənfi nəticələrə səbəb ola biləcək və ya hətta PCR reaksiyasına mane ola biləcək çirklərin tətbiqini minimuma endirmək üçün tərcümə edir. Bundan əlavə, reaksiya şərtləri bir qaçış daxilində hər bir fərdi nümunə üçün mümkün qədər eyni olmalıdır və sonrakı reaksiyalara (eyni metoddan) köçürülə bilər. Bu, reaksiyaların tərkibinə, həm də Cyclerdə temperatur nəzarət növünə aiddir. Əlbəttə ki, istifadəçi səhvləri mümkün qədər qarşısını almaq lazımdır.
Aşağıda, hazırlıq zamanı və bir PCR-in başlaması zamanı rast gəlinən problemləri nümayiş etdirəcəyik - və PCR iş axınlarının standartlaşdırılması üçün istifadə olunan alətlər və istehlak materialları ilə bağlı mövcud olan həllər üçün yanaşmalar.
Reaksiya hazırlığı
Reaksiya komponentlərinin PCR-gəmilərinə və ya plakatlara paylanması, müvafiq olaraq plakatlara və plakatların aradan qaldırılması lazım olan çox problemlərdən ibarətdir:
Reaksiya şərtləri
Fərdi komponentlərin dəqiq və dəqiq dozası mümkün olan ən çox reaksiya şərtlərini hədəf alarkən əvəzolunmazdır. Yaxşı bir boru texnikası ilə yanaşı, düzgün vasitəni seçərək kritikdir. PCR Master-Mixes tez-tez özlülük artıran və ya köpük yaradan maddələri ehtiva edir. Boru kəməri prosesi zamanı bunlar əhəmiyyətli islanmaya səbəb olurPipette haqqında göstərişlərvə beləliklə, beləliklə boru dəqiqliyini azaltmaq. Watting-ə daha az meylli olan birbaşa paylayan sistemlərin və ya alternativ pipet tövsiyələrinin istifadəsi, boru prosesinin düzgünlüyünü və dəqiqliyini artıra bilər.
Çirkləndirmə
Düzəltmə prosesi zamanı, aerozollar yaradılır, bu, boru kəmərinin içərisinə çatmağa icazə verilsə, növbəti boru kəməri zamanı başqa bir nümunəni potensial şəkildə çirkləndirə bilər. Buna filtr tövsiyələri və ya birbaşa yerdəyişmə sistemlərindən istifadə etməklə qarşısını almaq olar.
Kimi istehlak materiallarıgöstəriş, PCR iş axınında istifadə olunan gəmilər və plitələr nümunəni pozan və ya nəticəni saxtalaşdıran maddələrdən ibarət olmalıdır. Bunlara DNA, dnazalar, rnazes və pcr inhibitorları, habelə reaksiya zamanı maddi olaraq potensial olaraq nağıldan yuyula bilən komponentlər daxildir.
İstifadəçi səhvi
Daha çox nümunə işlənib, səhv riski yüksəkdir. Bir nümunənin yanlış gəmidə və ya səhv quyuya çevrildiyi asanlıqla baş verə bilər. Bu risk quyuların asanlıqla aydınlaşdırılması ilə xeyli azaldıla bilər. Dağıtma addımlarının avtomatlaşdırılması yolu ilə "insan amili", yəni səhvlər və istifadəçi ilə əlaqəli dəyişikliklər, beləliklə, çoxalmaya, xüsusən də kiçik reaksiya həcmində artan reproduksiya artırmaq üçün minimuma endirilir. Bu, bir iş stansiyasında işləməsi üçün kifayət qədər ölçülü sabitlik plitələrindən istifadə edir. Əlavə edilmiş barkodlar, bütün proses boyunca nümunə izləməsini asanlaşdıran əlavə maşın oxunuşunu təmin edir.
Termozikleri proqramlaşdırma
Proqramlaşdırma bir vasitə, səhv meylli olduğu kimi vaxt aparan ola bilər. Fərqli PCR termal sikler, bu prosesin addımını asanlaşdırmaq və ən əsası onu təhlükəsiz etmək üçün birlikdə işləyir:
Asan işləmə və yaxşı istifadəçi rəhbərliyi səmərəli proqramlaşdırmanın əsasını təşkil edir. Bu təməl üzərində bina, parolla qorunan istifadəçi administrasiyası, digər istifadəçilər tərəfindən dəyişdirilməsinin öz proqramlarının qarşısını alacaq. Bir çox velosipedçi (eyni tipli) istifadə olunursa, bir proqram birbaşa bir alətdən USB və ya əlaqə vasitəsi ilə ötürülə bilərsə, faydalıdır. Kompüter proqramı, proqramların mərkəzi və təhlükəsiz idarə olunmasına, istifadəçi hüquqları və sənədləri kompüterdə istifadə edir.
Pcr qaçır
Qaçış zamanı DNT, hər bir nümunənin eyni, ardıcıl reaksiya şərtlərinə məruz qalması lazım olduğu reaksiya gəmisində gücləndirilir. Aşağıdakı aspektlər proses üçün aktualdır:
Temperatur nəzarət
Temperaturun temperaturuna nəzarət və homojenliyində əla dəqiqlik, bütün nümunələrin temperatur kondisioneri üçün əsasdır. İstilik və soyutma elementlərinin yüksək keyfiyyəti (peltier elementləri), eləcə də bunların bloka qoşulduğu yol, "Edge effekti" kimi tanınan temperatur uyğunsuzluq riskini təyin edəcək qərar verən amillərdir
Buxarlanma
Fərdi reaksiya komponentlərinin konsentrasiyası buxarlanma səbəbindən reaksiya zamanı dəyişməməlidir. Əks təqdirdə, çox az şey mümkündürPCR məhsuluyaranır və ya heç biri. Buna görə etibarlı bir möhürlənərək buxarlanmanı minimuma endirmək çox vacibdir. Bu vəziyyətdə, termosiklorun qızılmış qapağı və gəminin möhürü əl-ələ. Müxtəlif möhürləmə variantları mövcuddurPCR plitələri (link: möhürləmə məqaləsi), himayədəki ən yaxşı möhür istilik sızdırması yolu ilə əldə edilir. Digər bağlanışlar da uyğun ola bilər, nə qədər ki, velosiped sürmə qapağının əlaqə təzyiqi seçilmiş möhürə tənzimlənə bilər.
Uzun müddətdə dəqiq və reproduklenci nəticələrin qorunması üçün standartlaşdırma standartlaşdırılması yerindədir. Buraya həmişə yaxşı iş şəraitində olmasını təmin etmək üçün avadanlıqların müntəzəm saxlanması daxildir. Bütün istehlak materialları istehsal olunan bütün püşklərdə ardıcıl olaraq yüksək keyfiyyətli olmalıdır və etibarlı mövcudluğu təmin edilməlidir.
Time vaxt: Nov-29-2022