PCR lövhələri ilə işləyərkən xətaların qarşısını almaq üçün 5 sadə məsləhət

Polimeraza zəncirvari reaksiyalar (PZR) həyat elmi laboratoriyalarında istifadə olunan geniş yayılmış üsullardan biridir.

PZR lövhələri nümunələrin və ya toplanmış nəticələrin mükəmməl işlənməsi və təhlili üçün birinci dərəcəli plastikdən hazırlanır.

Dəqiq istilik ötürülməsini təmin etmək üçün nazik və homojen divarlara malikdirlər.

Real vaxt tətbiqlərinə hazırlıq zamanı DNT və ya RNT-nin dəqiqəlik hissəsi ayrılır və PCR lövhələrində saxlanılır.

PCR plitələri istilik sızdırmazlığında yüksək effektivliyə malikdir və istilik axınını da məhdudlaşdırır.

Bununla belə, PCR lövhələri effektiv və etibarlı olduğu üçün nümunələrin işlənməsi zamanı səhvlər və qeyri-dəqiqliklər asanlıqla aradan qalxır.

Buna görə də yaxşı və yüksək keyfiyyət əldə etməkdə maraqlısınızsaPCR plitələri.Etibarlı PCR plitə istehsalçısı ilə əlaqə saxlamaq idealdır. Bununla siz ən yaxşı sövdələşməni əldə etdiyinizə əmin olursunuz.

Reagentlərin və ya nümunələrin çirklənməsinin qarşısını almaq və nəticələrə qeyri-dəqiqliklərin daxil olmasının qarşısını almaq üçün bəzi ehtiyat tədbirlərinə riayət etmək lazımdır.

Ətrafın Sterilizasiyası
Səhv müsbət və ya mənfi cəhətlər çirklərin olması səbəbindən baş verir, bu da nəticələrə şübhə edir.

Çirklər və çirkləndiricilər, əlaqəli olmayan DNT və ya kimyəvi əlavələr kimi müxtəlif formalarda baş verir və nəticədə reaksiyanın effektivliyini və effektivliyini azaldır.

PCR plitəsinin çirklənmə dərəcəsini əhəmiyyətli dərəcədə azaltmağın bir çox yolu var.

Sterilləşdirilmiş filtr uclarından istifadə çirklərin pipetlər vasitəsilə nümunələrinizə keçməsinin qarşısını almaq üçün başqa faydalı üsuldur.

Yalnız PCR-dən istifadə üçün pipetlər və rəflərdən ibarət tamamilə təmiz avadanlıq dəstini ayırın. Bu, laboratoriya ətrafında çirklərin və ya çirkləndiricilərin cüzi şəkildə ötürülməsinə zəmanət verəcəkdir.

Çirkləndiriciləri silmək üçün pipetlərdə, stendlərdə və skamyalarda ağartıcılardan, etanoldan istifadə edin.

Hissəciklərin çirklənməsini minimuma endirmək üçün bütün PCR reaksiyalarınız üçün ayrılmış yer ayırın.

Hər addımda təmiz əlcəklərdən istifadə edin və onları tez-tez dəyişdirin.

PCR plitələri
Şablonun konsentrasiyasını və təmizliyini yoxlayın.
Nümunələrin PCR ilə təhlili zamanı istifadə olunan dəzgahın və avadanlıqların təmizliyi qorunmalıdır. Təhlildən və emaldan əvvəl nümunələrin təmizlik dərəcəsini yoxlamaq vacibdir.

Ümumiyyətlə, analizatorlar DNT nümunələrinin konsentrasiyası və təmizlik səviyyəsini nəzərə alırlar.

260nm/280nm üçün absorbans nisbəti 1,8-dən az olmamalıdır. Çirkləri müəyyən etmək üçün 230nm və 320nm arasındakı sonrakı dalğa uzunluğu istifadə olunur.

Məsələn, xaotrop duzlar və digər üzvi birləşmələr 230nm udma sürətində aşkar edilir. DNT nümunələrindəki bulanıqlıq da 320nm udma sürətində aşkar edilir və yoxlanılır.

PCR lövhələrini məhsulla həddən artıq yükləməyin
Eyni vaxtda bir neçə məhsulun işlədilməsi nə qədər istəsə də, bu, PCR lövhələrinin çarpaz çirklənməsi ilə nəticələnir.

PCR lövhələrinin müxtəlif məhsul tullantıları ilə həddən artıq yüklənməsi nümunələrin müəyyən edilməsini son dərəcə çətinləşdirir.

Aliquot PCR Reagentlərinin Qeydlərini Saxlayın
Davamlı donma/ərimə dövrləri və alikvotun tez-tez istifadəsi yenidən kristallaşma yolu ilə PCR reagentlərinə, fermentlərə və DNTP-lərə zərər verə bilər.

Təhlil ediləcək nümunələri hazırlayarkən həmişə istifadə olunan alikot dərəcəsinə nəzarət etməyə çalışın.

Üstünlük verilən LIMS inventar və dondurulmuş və ya ərimiş reagentlərin və nümunələrin miqdarına nəzarət etmək üçün daha uyğundur.

Ən yaxşı qızartma temperaturunu seçin.
Yanlış yumşalma temperaturunun seçilməsi və istifadəsi PCR nəticələrində səhv olan başqa bir üsuldur.

Bəzən reaksiya planlaşdırıldığı kimi getmir. Uğurlu reaksiyanı asanlaşdırmaq üçün yumşalma temperaturunun azaldılması arzu edilir.

Bununla belə, temperaturun aşağı salınması yalançı pozitivlərin və primer dimerlərinin görünüşünün şansını artırır.

PCR plitələrindən istifadə edərkən ərimə əyrisinin təhlilini təsdiqləmək vacibdir, çünki bu, düzgün yumşalma temperaturunun seçilməsi üçün yaxşı göstəricidir.

Primer dizayn proqramı dizaynla kömək edir, PCR plitələrindəki səhvləri birbaşa azaldır və düzgün yumşalma temperaturunu təmin edir.

Yüksək keyfiyyətli PCR lövhəsinə ehtiyacınız varmı?
Etibarlı istehsalçını haradan tapacağınızı düşünürsünüzsəPCR plitələri. Daha çox axtarmayın, çünki doğru yerdəsiniz.

Lütfənbizimlə əlaqə saxlamaq üçün bura klikləyinbankı sındırmayacaq qiymətə yüksək keyfiyyətli məhsul və xidmət üçün.


Göndərmə vaxtı: 30 oktyabr 2021-ci il