كيفية سحب كميات صغيرة باستخدام الماصات اليدوية المحمولة

ونظرًا لزيادة التركيز على تقليل الكواشف والتكاليف، يزداد الطلب على الكميات الأصغر، على سبيل المثال، لإعداد PCR Mastermix أو تفاعلات الإنزيمات. لكن سحب عينات صغيرة من 0.2 إلى 5 ميكرولتر يضع تحديات جديدة فيما يتعلق بدقة سحب العينة وإحكامها. النقاط التالية ضرورية:

1. حجم الماصة والطرف: اختر دائمًا الماصة ذات أقل حجم اسمي ممكن وأصغر طرف للحفاظ على وسادة الهواء صغيرة قدر الإمكان. عند سحب 1 ميكرولتر على سبيل المثال، اختر ماصة 0.25 – 2.5 ميكرولتر وطرف مطابق بدلاً من ماصة 1 – 10 ميكرولتر.
2. المعايرة والصيانة: من الضروري أن تتم معايرة الماصات الخاصة بك وصيانتها بشكل صحيح. تؤدي التعديلات الصغيرة والأجزاء المكسورة على الماصة إلى زيادة هائلة في قيم الخطأ المنهجية والعشوائية. يجب إجراء المعايرة وفقًا للمواصفة ISO 8655 مرة واحدة سنويًا.
3. ماصات ذات إزاحة موجبة: تحقق مما إذا كان لديك ماصة ذات إزاحة موجبة ذات نطاق حجم منخفض في مختبرك. بشكل عام، يؤدي استخدام هذا النوع من الماصات إلى نتيجة سحب أفضل من حيث الدقة والإحكام مقارنةً بالماصات التقليدية ذات الوسائد الهوائية.
4. حاول استخدام كميات أكبر: قد تفكر في تخفيف عينتك للحصول على كميات أكبر من الماصة بنفس الكمية في التفاعل النهائي. يمكن أن يؤدي ذلك إلى تقليل أخطاء سحب العينة بكميات صغيرة جدًا من العينات.

بالإضافة إلى الأداة الجيدة، يجب أن يكون لدى الباحث تقنية سحب جيدة جدًا. انتبه بشكل خاص إلى الخطوات التالية:

1. ملحق الطرف: لا تقم بتكديس الماصة على الطرف لأن ذلك قد يؤدي إلى إتلاف طرف الطرف الدقيق مما يتسبب في إعادة توجيه شعاع السائل أو إتلاف الفتحة. لا تطبق سوى الضغط الخفيف عند إرفاق طرف واستخدام ماصة مع مخروط طرف محمل بنابض.
2. الإمساك بالماصة: لا تمسك الماصة بيدك أثناء انتظار جهاز الطرد المركزي أو التدوير، وما إلى ذلك. سوف يسخن الجزء الداخلي للماصة ويؤدي إلى تمدد وسادة الهواء مما يؤدي إلى انحرافات عن الحجم المحدد عند سحب الماصة.
3. الترطيب المسبق: يقوم ترطيب الهواء داخل الطرف والماصة بتحضير الطرف للعينة ويتجنب التبخر عند شفط حجم النقل.
4. الشفط العمودي: هذا مهم جدًا عند التعامل مع كميات صغيرة لتجنب التأثير الشعري الذي يحدث عند إمساك الماصة بزاوية.
5. عمق الغمر: اغمر الطرف بأقل قدر ممكن لمنع دخول السائل إلى الطرف بسبب التأثير الشعري. القاعدة الأساسية: كلما كان الطرف والحجم أصغر، انخفض عمق الغمر. نوصي بحد أقصى 2 مم عند سحب كميات صغيرة.
6. التوزيع بزاوية 45 درجة: يتم ضمان التدفق الأمثل للسائل عند الإمساك بالماصة بزاوية 45 درجة.
7. الاتصال بجدار الوعاء أو سطح السائل: لا يمكن توزيع الكميات الصغيرة بشكل صحيح إلا عندما يكون الطرف مثبتًا على جدار الوعاء، أو مغمورًا في السائل. حتى آخر قطرة من الطرف يمكن الاستغناء عنها بدقة.
8. النفخ: النفخ إلزامي بعد توزيع كميات منخفضة لتوزيع حتى آخر قطرة من السائل الموجود في الطرف. وينبغي أيضًا أن يتم التفجير على جدار الوعاء. يجب الحرص على عدم إدخال فقاعات الهواء إلى العينة عند إجراء التفجير على سطح السائل.