Hoe om 'n PCR-plaat te verseël

Inleiding

PCR plate, 'n stapelvoedsel van die laboratorium vir baie jare, word selfs meer algemeen in die moderne omgewing namate laboratoriums hul deurset vergroot en toenemend outomatisering binne hul werkvloei gebruik. Om hierdie doelwitte te bereik, terwyl die akkuraatheid en integriteit van eksperimente behou word, kan moeilik wees. Een van die algemene areas waar foute kan insluip is met die verseëling vanPCR plate, met swak tegniek wat verdamping van monsters moontlik maak, die pH verander en dus ensiematiese funksies ontwrig en kontaminasie uitnodig. Leer hoe om aPCR plaatelimineer hierdie risiko's korrek en verseker reproduceerbare resultate.

Vind die regte seël vir jou PCR-plaat

Plaatdoppies vs filmseëls vs deksels
Doppiesis 'n goeie manier om jou bord met 'n stewige seël te verseël, terwyl jy steeds die buigsaamheid gee om die bord baie maklik te ontseël en te herseël soos jy nodig het sonder enige vermorsing. Pette het egter 'n paar belangrike nadele.

Eerstens sal jy die spesifieke pet moet koop wat versoenbaar is, wat hulle nie veelsydig maak nie. Jy sal moet seker maak dat die pet wat jy kies pas by die plaat, wat afhanklik is van die vervaardiger daarvan, en kies óf koepelvormig óf plat op grond van die termofietsryer wat jy gebruik.

Tweedens kan dit baie herhalend en vervelig wees om die pette op die bord aan te wend, met die risiko van kruisbesmetting as jy die verkeerde dop op die verkeerde put sit.

Alhoewel filmseëls minder buigsaam is in terme van verwydering en vervanging, is hulle baie veelsydig aangesien dit enige tipe PCR-plaat sal pas, sonder om te let op wie die vervaardiger is. Hulle kan eenvoudig op maat gesny word, wat hulle baie effektief maak.

Nog 'n opsie is 'n borddeksel. Dit bied minder beskerming as doppe en seëls, en word hoofsaaklik net vir korttermyndekking gebruik om kontaminasie te voorkom.

Optiese vs. Foeliefilmseëls

Of jy nou 'n optiese, duidelike seël of 'naluminiumfoelie filmom jou bord te verseël word bepaal deur jou eksperimentele formaat.Optiese seëlfilmsis deursigtig sodat jy monsters kan waarneem, terwyl dit steeds beskerm word en verdamping voorkom. Hulle is ook veral nuttig in qPCR-eksperimente wat behels dat hoogs akkurate metings van fluoressensie direk vanaf die plaat gemaak word, in welke geval jy 'n seëlfilm sal benodig wat so min fluoressensie as moontlik uitfiltreer. Dit is belangrik om seker te maak dat die seël of pet wat jy gebruik 'n hoë genoeg vlak van optiese helderheid het om te verseker dat lesings akkuraat is.

Foeliefilms is geskik vir enige monsters wat ligsensitief is of by onder 80°C gestoor moet word. Om hierdie rede sal die meeste monsters wat vir langtermynberging bestem is, 'n foeliefilm benodig. Foeliefilms is ook deursteekbaar, wat nuttig is vir óf die ondersoek van individuele putte, óf vir die oordrag van monsters deur naalde. Dit kan met die hand of as deel van 'n robotplatform plaasvind.

Neem ook in ag dat aggressiewe stowwe wat sure, basisse of oplosmiddels insluit 'n seël benodig wat dit kan weerstaan, in welke geval 'n foelieseël waarskynlik meer gepas is.

Gom vs. hitte-seëlfilm
Kleeffilm seëlsis baie reguit en maklik om toe te pas. Al wat jy nodig het, is dat 'n gebruiker die seël op die plaat aanbring en 'n eenvoudige toediener gebruik om af te druk en 'n digte seël te vorm.

Hitte seëls is meer gevorderd, wat 'n langer blywende seël bied wat verdampingstempo's verminder het in vergelyking met 'n konvensionele gom seël. Hierdie opsie is gepas as jy op lang termyn monsters wil stoor, alhoewel dit met 'n bykomende vereiste vir plaatseëltoerusting kom.

Hoe om 'n PCR-plaat te verseël

Plaat verseël metode

Selfklevend

1. Maak seker jy werk op 'n plat en stabiele werkoppervlak

2. Haal die film uit sy verpakking en verwyder die rugkant

3. Plaas die seël versigtig op die bord, terwyl jy seker maak dat al die putte bedek is

4. Gebruik 'n toediener om druk oor die plaat toe te pas. Begin van die een kant af en werk jou pad na die ander kant, druk eweredig

5. Herhaal dit talle kere

6. Draai jou toediener om die buiteputte om seker te maak dit is ook behoorlik verseël.

Hitte seëls

Hitte seëls werk deur die film aan die rand van elke put te smelt, met behulp van 'n plaatverseëlaar. Verwys na die instruksies wat deur die vervaardiger van die toerusting verskaf word om 'n hitteseëlaar te gebruik. Maak seker dat die vervaardiger van wie jy jou toerusting verkry, betroubaar is, aangesien dit baie belangrik is dat die seël behoorlik, doeltreffend en waterdig is.

Plaat Seël Top Wenke

a. Wanneer druk op die seël toegepas word, gaan in beide horisontale en vertikale rigtings om 'n behoorlike seël te verseker

b. Dit is altyd goeie oefening om 'n toetslopie te doen van wat jy ook al doen, en dit is nie anders met plaatverseëling nie. Toets met 'n leë plaat voordat een met monsters gebruik word.

c. Wanneer jy toets, haal die seël af en kyk of die gom behoorlik vasgeplak het, sonder gapings. Daar is 'n visuele voorstelling hiervan in die eerste verwysingsdokument. As jy nie die plaat behoorlik verseël het nie, wanneer jy die seël verwyder, sal daar gapings wees waar die gom nie heeltemal aan die plaat geheg het nie.

d. Vir die versending en vervoer van monsters, kan jy vind dat dit nuttig is om 'n plastiekseël bo-op die foelie seël aan te wend vir ekstra beskerming (veral teen piercing).

e. Maak altyd seker dat daar geen stampe of plooie is wanneer die film aangebring word nie – dit sal lekkasies en verdamping veroorsaak